Brain Heart Infusion Broth ISO

L'infuso di cervello di vitello, il digerito enzimatico di tessuto animale e l'infuso di cuore di manzo forniscono azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico. L'idrogenofosfato di sodio è un tampone. Il glucosio è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia.

La prova della coagulasi si considera positiva se il volume del coagulo supera la metà del volume iniziale del liquido.

Preparazione

Sospendere 37 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in contenitori adatti e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.

Secondo ISO 6888

Per la conferma degli stafilococchi coagulasi-positivi secondo ISO 6888:

1. Prelevare l'inoculo dalla superficie di ogni colonia selezionata con un filo sterile e introdurlo in una provetta o in un flacone contenente Brain-heart infusion.
2. Incubare a 35-37 °C per 24 ± 2 ore.
3. In condizioni asettiche, aggiungere 0,1 mL di ogni coltura a 0,3 mL di plasma di coniglio in provette o flaconi sterili per emolisi.
4. Incubare a 35-37 °C.
5. Esaminare la coagulazione del plasma inclinando la provetta dopo 4-6 ore di incubazione.

Se la prova è negativa:

1. Riesaminare dopo 24 ore di incubazione o al termine del periodo di incubazione raccomandato dal produttore.
2. Come controllo negativo per ogni lotto di plasma, aggiungere 0,1 mL di Brain-heart infusion alla quantità di plasma di coniglio indicata dal produttore e incubare senza inoculo.
3. Perché la prova sia valida, il controllo del plasma non deve mostrare alcun segno di coagulazione.

• International Standard ISO 6888-1 Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the enumeration of coagulase-positive staphylococci (Staphylococcus aureus and other species) - Part 1: Technique using Baird-Parker agar medium.