Cryopreserve Beads Red

In condizioni asettiche, preparare nella fiala una sospensione densa (oltre lo standard 2 McFarland) di batteri puri da colture giovani (20-24 ore).

Mescolare la fiala per impregnare le sfere con le cellule batteriche e togliere la crio-soluzione aspirandola con una pipetta sterile. Usata come raccomandato, ogni fiala conserva 25 ± 5 sfere, potenziali colture identiche.

Chiudere bene il criotubo; registrare e identificare le fiale con un pennarello indelebile o con etichette resistenti al freddo. I colori dei tappi e delle sfere offrono un sistema per differenziare le specie.

Conservare le fiale inoculate a -25 °C, -30 °C, -35 °C o fino a -80 °C, per i migliori risultati a lungo termine.

Per recuperare il microrganismo, aprire una fiala in condizioni asettiche e togliere una sfera con un ago sterile o con una pinza sterile. La sfera inoculata si può poi usare per una semina diretta per striscio su terreno solido oppure si può lasciar cadere in un terreno liquido adatto.

La fiala va richiusa al più presto e rimessa subito a bassa temperatura. Gli sbalzi eccessivi di temperatura riducono la vitalità dei microrganismi.

Permette di conservare con successo varie specie di Actinobacillus, Clostridium, Haemophilus, Neisseria, Pasteurella, Yersinia, Vibrio e un buon numero di Enterobacteriaceae, Staphylococcus, Lactobacillus e Streptococcus.

Si usa anche per muffe (per esempio Aspergillus) e lieviti (Saccharomyces, Candida e altri) con buoni risultati, lavorando da -30 °C, per 4 anni di congelamento.

La letteratura di riferimento indica fino a 10 anni, lavorando a temperature più basse, come da -60 a -80 °C.

Si noti che alcuni microrganismi esigenti e alcuni funghi specifici possono risentire negativamente della temperatura di congelamento. Consigliamo quindi di eseguire prove specifiche per i ceppi particolari.

Controllo fisico-chimico

Controllo microbiologico

Preparare una sospensione da coltura pura.

Aspirare con la pipetta il liquido in eccesso dopo l'agitazione su vortex per ricoprire le sfere di microrganismi - 30 s.

Congelare a circa -30 °C per 2 giorni.

Scongelare - semina per striscio con tampone - incubare per 24-48 h.

Controllo di sterilità

Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.

Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.

• Murray, P.R. et al. 1995 Manual of Clinical Microbiology. 6th Ed. American Society for Microbiology. Washington DC.
• Chandler, D. Cryopreservation of fungal spores using porous beads, Mycol. Res. 98(5) 525-526 (1994).