E. coli-Coliforms Supplement (BOE)

Descrizione

La cefsulodina e la vancomicina sopprimono tutto il microbiota di accompagnamento, in particolare Pseudomonas e Aeromonas spp.

Tecnica

Raccogliere, diluire e preparare campioni e volumi secondo le specifiche, le direttive, le norme ufficiali e/o i risultati attesi.

Ricostituire la fiala con il diluente sterile in condizioni asettiche e aggiungerla a 500 mL di agar base fuso e raffreddato a 50 °C.

Non surriscaldare dopo l'aggiunta del supplemento.

Versare il terreno completo in piastre di Petri e, una volta solidificato su una superficie piana, seminare le piastre per striscio o con il metodo a spirale.

Incubare le piastre in atmosfera aerobica a 35 ± 2 °C per 24-48 h.

(L'incubazione a 44 ± 0,5 °C aumenta la selettività del terreno e la specificità per l'isolamento di E. coli.)

Dopo l'incubazione, contare tutte le colonie comparse sulla superficie dell'agar, osservando lo sviluppo del colore quando si usa una base cromogenica:

E. coli produce colonie da blu scuro a viola, perché possiede due enzimi che scindono le sostanze cromogeniche.

I batteri coliformi hanno un solo enzima, quindi possono scindere un solo substrato e producono colonie salmone/rosse.

I coliformi totali sono la somma delle colonie di E. coli e delle colonie rosso salmone.

L'isolamento presuntivo di E. coli/coliformi va confermato con ulteriori prove microbiologiche e biochimiche.

Ricostituire la fiala liofilizzata originale aggiungendo 6 mL di acqua distillata sterile.

Nota: ogni fiala è sufficiente per integrare 500 mL di terreno base: Chromogenic Coliform Agar.

Controllo fisico-chimico

Controllo microbiologico

Ricostituire 1 fiala come indicato in Composizione; agitare e sciogliere completamente.

Aggiungere 1 fiala a 500 mL di terreno base. NON RISCALDARE dopo l'aggiunta del supplemento.

Distribuire in piastre da 90 mm il terreno completo, raffreddato a 50 °C.

Incubare secondo le istruzioni per il terreno completo indicate in Composizione.

Aerobiosi. Incubazione a 35 ± 2 °C, lettura a 24-48 ore.

Controllo di sterilità

100 mL di TSB e 100 mL di Thioglycollate.

Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.

Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.

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