DNA polimerasi
AQ97 Hot Start High Fidelity DNA Polymerase
DNA polimerasi hot start ad alta fedeltà (>60x Taq) con correzione di bozze, per ampliconi fino a 18 kb
- Codice
- A787501
- Categoria
- DNA polimerasi
- Formati
- 4 formati
- Produttore
DNA polimerasi chimerica termostabile con attività di correzione di bozze, progettata per un'amplificazione ad alta fedeltà e a basso bias. Un sistema hot start mediato da anticorpo blocca sia l'attività polimerasica sia quella esonucleasica fino alla denaturazione iniziale di 2 minuti a 98 °C, per cui le reazioni si allestiscono a temperatura ambiente con maggiore specificità. La fusione con un dominio di legame al DNA aumenta velocità e processività: l'enzima estende a circa 10 secondi per kb e amplifica bersagli fino a 18 kb da DNA genomico e 25 kb da DNA lambda. La fedeltà, misurata con un metodo basato su NGS, supera di oltre 60 volte quella della Taq DNA polimerasi.
Caratteristiche principali
Attività esonucleasica 3'-5' di correzione di bozze e basso tasso di errore, misurato con analisi NGS.
Polimerasi ed esonucleasi restano inattive durante l'allestimento a temperatura ambiente; attivazione in 2 minuti.
Ampliconi fino a 18 kb da DNA genomico e 25 kb da DNA lambda.
Amplifica bersagli da ricchi in AT a ricchi in GC; testata su DNA genomico umano dal 29% al 78% di GC.
Applicazioni
- Clonaggio e subclonaggio
- Applicazioni NGS
- Analisi di SNP
- Mutagenesi
- PCR long range
- Amplificazione di bersagli ricchi in GC o in AT
Specifiche tecniche
| Concentrazione | 2 U/µL |
|---|---|
| Tipo di enzima | DNA polimerasi chimerica termostabile con dominio di legame al DNA, hot start mediato da anticorpo |
| Attività | Polimerasica 5'-3' ed esonucleasica 3'-5' (correzione di bozze) |
| Fedeltà | Oltre 60 volte la Taq DNA polimerasi (analisi NGS) |
| Velocità di elongazione | Circa 10 s/kb |
| Lunghezza dell'amplicone | Fino a 18 kb (DNA genomico), 25 kb (DNA lambda) |
| Attivazione | 2 minuti a 98 °C |
| Fornito con | 5x AQ97 Buffer (7,5 mM MgCl2, pari a 1,5 mM nella reazione) e MgCl2 25 mM |
| Tampone di conservazione | 50 mM Tris-HCl pH 8,0, 100 mM KCl, 0,1 mM EDTA, 1,0 mM DTT, 0,1% polisorbato 20, 50% glicerolo |
| Additivi consigliati | Betaine Enhancer Solution 1-2 M per bersagli GC-rich, lunghi o molto strutturati |
| Conservazione | Temperatura ambiente fino a 5 giorni; 4 °C fino a 6 mesi; -20 °C a lungo termine |
| Spedizione | In ghiaccio secco |
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