Mix per PCR e qPCR
GC TEMPase 2x Master Mix I
Master mix hot start 2x pronta all'uso con GC Buffer I, per amplificare DNA ricco in GC
- Codice
- A331701
- Categoria
- Mix per PCR e qPCR
- Formati
- 4 formati
- Produttore
Master mix 2x pronta all'uso per l'amplificazione di sequenze di DNA ricche in GC: contiene TEMPase Hot Start DNA Polymerase, GC Buffer I con enhancer, dNTP e MgCl2, e richiede solo l'aggiunta di primer, stampo e acqua. La polimerasi, una Taq modificata chimicamente, resta inattiva durante l'allestimento a temperatura ambiente e si attiva con 15 minuti a 95 °C, limitando l'estensione di primer appaiati in modo aspecifico. È la prima scelta quando una master mix hot start standard non funziona su un bersaglio GC-rich.
Caratteristiche principali
Alto tasso di successo su GC-rich
In uno studio di copertura ha amplificato con buone prestazioni ampliconi con contenuto in GC dal 41% al 78%.
Hot start chimico
Il sito attivo è bloccato fino all'attivazione termica, per reazioni più specifiche e allestimento a temperatura ambiente.
Sensibilità e specificità
Alta sensibilità, alta resa e formazione ridotta di prodotti aspecifici.
Ampliconi fino a 5 kb
Gestisce prodotti fino a 5 kb in un formato tutto in uno.
Applicazioni
- Amplificazione di bersagli di DNA ricchi in GC
- Bersagli con contenuto in GC variabile
- PCR da DNA genomico, plasmidico e batterico
- Saggi falliti con master mix hot start standard
Specifiche tecniche
| Composizione | TEMPase Hot Start DNA Polymerase, GC Buffer I con enhancer, dNTP, MgCl2 |
|---|---|
| MgCl2 | 3,0 mM nella master mix 2x, pari a 1,5 mM nella reazione (regolabile fino a 4,5 mM) |
| Volume di reazione | 50 µL |
| Attivazione | 15 minuti a 95 °C |
| Lunghezza dell'amplicone | Fino a 5 kb |
| Estensione | Circa 1.000 basi al minuto a 72 °C |
| Conservazione | -20 °C a lungo termine; 4 °C fino a 3 mesi |
| Spedizione | In ghiaccio secco |
| Controllo qualità | Polimerasi testata per l'assenza di attività endonucleasiche, di nicking ed esonucleasiche |
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