Terreni pronti all'uso
Legionella BCYE Agar w/o Cysteine ISO
Terreno selettivo per lo studio delle Legionellaceae, formulato secondo ISO 11731.
- Codice
- LC-978
- Categoria
- Terreni pronti all'uso
- Formato
- 20 piastre da 90 mm
- Controllo qualità ISO 17025
- Sì
- Conservazione
- da 2 a 14 °C
- Validità minima garantita
- 1 mese
- Norme
- ISO 11731
Terreni pronti all'uso in piastre, piastre a contatto, provette, flaconi e sacche.
Caratteristiche principali
Conta selettiva di Legionella.
Acque.
ISO 11731.
20 piastre pronte da 90 mm con 22 ± 2 mL.
Descrizione e tecnica
Raccogliere, diluire e preparare campioni e volumi secondo le specifiche, le direttive, le norme ufficiali e/o i risultati attesi.
Questo terreno è adatto anche al campionamento ambientale dell'aria (compatibilità totale con i campionatori d'aria in commercio).
Seminare le piastre per striscio o con il metodo a spirale.
Incubare le piastre non capovolte a 36 ± 2 °C fino a 5-10 giorni, in una camera o in una giara ad alta umidità.
(A seconda del campione, delle specifiche, ecc., possono essere necessari tempi di incubazione più lunghi di quelli indicati sopra o temperature di incubazione diverse.)
Dopo l'incubazione, contare tutte le colonie comparse sulla superficie dell'agar.
Le colonie sono di solito visibili dopo 3-4 giorni di incubazione. Hanno un aspetto mucoso, lucido, bianco-grigio e misurano da 2 a 3 mm di diametro.
Legionella non cresce sui terreni privi dell'arricchimento con cisteina.
All'esame microscopico Legionella appare estremamente polimorfa, con forme corte a bastoncino e lunghi filamenti.
Sono Gram-negative e debolmente positive all'ossidasi e alla catalasi.
L'identificazione completa va eseguita con tecniche immunologiche e cromatografiche.
Ogni laboratorio deve valutare i risultati secondo le proprie specifiche, a confronto con i risultati ottenuti con un terreno con aggiunta di cisteina.
Calcolare la carica microbica totale per mL di campione moltiplicando il numero medio di colonie per piastra per l'inverso del fattore di diluizione, se è stato seminato un campione diluito. Riportare i risultati come unità formanti colonia (UFC) per mL o per g, insieme al tempo e alla temperatura di incubazione.
Presentazione
| Presentazione | 20 piastre pronte da 90 mm |
|---|---|
| Riempimento | 22 ± 2 mL |
| Confezione | 1 scatola con 2 confezioni da 10 piastre. Cellophane singolo. |
Composizione
| Componente | g/L |
|---|---|
| Carbone attivo | 2,00 |
| Estratto di lievito | 10,0 |
| Tampone ACES | 10,0 |
| Idrossido di potassio | 2,80 |
| Alfa-chetoglutarato | 1,00 |
| Pirofosfato ferrico | 0,25 |
| Agar | 15,0 |
Controllo qualità
Controllo fisico-chimico
| Colore | Nero |
|---|---|
| pH | 6,8 ± 0,2 a 25 °C |
Controllo microbiologico
Semina a spirale: intervallo pratico 100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC (produttività) / 10⁴-10⁶ UFC (selettività).
Controllo microbiologico secondo ISO 11133:2014/Amd 1:2018.
Aerobiosi. Incubazione a 36 ± 2 °C. Lettura a 3-5 giorni.
| Microrganismo | Crescita |
|---|---|
| Legionella pneumophilaATCC 33152, WDCM 00107 | Inibito |
| Escherichia coliATCC 25922, WDCM 00013 | Buona |
Controllo di sterilità
Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.
Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.
Bibliografia
- ATLAS, R.M. & L.C. PARKS (1993) Handbook of Microbiological Media. CRC Press. Boca Raton. Fla. USA.
- CLESCERI, L.S., A.E. GREENBERG & A.D. EATON (1998) Standard methods for the examination of water and wastewater. 9-106. 20th edition. APHA-AWWA-WEF. Washington DC, USA.
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- FEELEY, J.C., R.J. GIBSON, G.W. GORMAN, N.C. LANGFORD, J.K. RASHEED, C.D. MACKEL & W.B. BAINE (1979) Charcoal-Yeast Extract Agar: Primary isolation medium for Legionella pneumophila. J. Clin. Microbiol. 10(4) 437.
- ISO 11731 Standard (2017) Water Quality - Enumeration of Legionella.
- ISO 11133:2014/Amd 1:2018. Microbiology of food, animal feed and water. Preparation, production, storage and performance testing of culture media.
- MacFADDIN, J.F. (1985) Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria.
- PASCULLE, A.W., J.C. FEELEY, R.J. GIBSON, L.G. CORDES, R.L. MYEROWITZ, C.M. PATTON, G.W. GORMAN, C.L. CARMACK, J.W. EZZELL & J.N. DOWLING (1980) Pittsburgh pneumonia agent: Direct isolation from human lung tissue. J. Infect. Dis., 141:727.
- UNE-EN ISO 11133 (2014). Microbiología de los alimentos para consumo humano, alimentación animal y agua - Preparación, producción, conservación y ensayos de rendimiento de los medios de cultivo.
- WARD, K.W. (1995) Processing and interpretation of specimens for Legionella spp. In "Clinical Microbiology Procedures Handbook" Chap. 12.1 edited by H.D. Isenberg. ASM Press. Washington DC, USA.
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