Terreni pronti all'uso
TSC Agar with Egg Yolk
Terreno raccomandato per l'isolamento, la coltivazione e la conta di Clostridium perfringens, secondo le norme ISO.
- Codice
- LC-964
- Categoria
- Terreni pronti all'uso
- Formato
- 20 piastre da 90 mm
- Conservazione
- da 2 a 14 °C
- Validità minima garantita
- 1 mese
- Norme
- ISO 14189ISO 7937
Il terreno è una modifica del classico TSN Agar, in cui gli antibiotici tradizionali, polimixina e neomicina, sono stati sostituiti dalla cicloserina. La cicloserina si è dimostrata più selettiva per Clostridium perfringens e riduce la formazione di annerimento diffuso. Clostridium perfringens è più resistente alla cicloserina che alla sulfadiazina, alla polimixina e alla neomicina, e questo permette di ridurre la dose. La presenza di metabisolfito di sodio e di citrato ferrico ammonico permette di verificare con un solo saggio tre caratteristiche differenziali di questa specie anaerobia. Queste caratteristiche sono la riduzione del solfito, la crescita a 44 ± 1 °C e la resistenza alla cicloserina.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Rilevazione e conta selettiva di Clostridium perfringens.
Settori
Alimenti, acque.
Norme
ISO 14189, ISO 7937.
Presentazione
20 piastre pronte da 90 mm con 21 ± 2 mL.
Descrizione e tecnica
Tecnica
Raccogliere, diluire e preparare campioni e volumi da filtrare secondo le specifiche, le direttive, le norme ufficiali e/o i risultati attesi.
Inoculare il campione e coprirlo con un secondo strato di agar fuso a temperatura ambiente.
Incubare le piastre in anaerobiosi a 44 ± 1 °C per 21 ± 3 h.
(A seconda del campione, delle specifiche, ecc., possono essere necessari tempi di incubazione più lunghi di quelli indicati sopra o temperature di incubazione diverse.)
Dopo l'incubazione, contare le colonie con un precipitato nero di solfuro di ferro (H₂S+).
Le colonie caratteristiche vanno confermate come C. perfringens con ulteriori prove microbiologiche o biochimiche.
Presentazione
| Presentazione | 20 piastre pronte da 90 mm |
|---|---|
| Riempimento | 21 ± 2 mL |
| Confezione | 1 scatola con 2 confezioni da 10 piastre. Cellophane singolo. |
Composizione
| Componente | g/L |
|---|---|
| Triptone | 15,0 |
| Peptone di soia | 5,0 |
| Estratto di lievito | 5,0 |
| Metabisolfito di sodio | 1,0 |
| Citrato ferrico ammonico | 1,0 |
| Cicloserina | 0,4 |
| Emulsione di tuorlo d'uovo | 50,0 mL |
| Agar | 18,0 |
Controllo qualità
Controllo fisico-chimico
| Colore | Giallo |
|---|---|
| pH | 7,6 ± 0,2 a 25 °C |
Controllo microbiologico
Inoculo: intervallo pratico 100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC (produttività) / 10⁴-10⁶ (selettività).
Controllo microbiologico secondo ISO 11133:2014/Amd 1:2018.
Anaerobiosi. Incubazione a 44 ± 1 °C per 21 ± 3 h.
| Microrganismo | Crescita |
|---|---|
| Clostridium perfringensATCC 13124, WDCM 00007, NCTC 8237 | Buona (≥ 50 %) |
| Bacillus subtilisATCC 6633, WDCM 00003 | Inibito |
Controllo di sterilità
Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.
Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.
Bibliografia
- ATLAS, R.M., L.C. PARKS (1993) Handbook of Microbiological Media. CRC Press, Inc. London.
- DIN Standard 10165. Referenz Verfahren fur Bestimmung von Clostridium perfringens. Fleisch und Fleischerzeugnissen.
- DOWNES, F.P. & K. ITO (2001) Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods. 4th ed. American Public Health Association. Washington.
- DIRECTIVA 2015/1787/UE de la Comisión por la que se modifica la Directiva 98/83/CE relativa a la calidad de las aguas destinadas al consumo humano (DO L260 de 7.10.2015 pg 6 y ss).
- FDA (Food and Drug Administration) (1998) Bacteriological Analytical Manual. 8th ed. Rev. A. AOAC International Inc. Gaithersburg. MD.
- ISO 7937 (2004) Microbiology of Food and Animal Feeding Stuffs. Horizontal Method for Enumeration of C. perfringens. Colony-count technique.
- ISO 6461-2 (1986) Water Quality - Detection and enumeration of the spores of sulfite-reducing anaerobes (Clostridia) - Part 2: Method by Membrane Filtration.
- ISO 11133:2014/Amd 1:2018. Microbiology of food, animal feed and water. Preparation, production, storage and performance testing of culture media.
- ISO 14189 (2013) Water quality. Enumeration of Clostridium perfringens - Method using membrane filtration.
- SMITH, L.D. (1981) Clostridial Anaerobic Infections, in Diagnostic Procedures for Bacterial Mycotic and Parasitic Infections. 6th ed. APHA. Washington.
- UNE-EN ISO 11133 (2014). Microbiología de los alimentos para consumo humano, alimentación animal y agua - Preparación, producción, conservación y ensayos de rendimiento de los medios de cultivo.
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