Terreni pronti all'uso
Palcam Listeria Agar ISO
Terreno solido, selettivo e differenziale per la rilevazione, la conta e l'isolamento di Listeria spp., secondo le norme ISO 11290-1 e 11290-2.
- Codice
- LC-955
- Categoria
- Terreni pronti all'uso
- Formato
- 20 piastre da 90 mm
- Controllo qualità ISO 17025
- Sì
- Conservazione
- da 2 a 14 °C
- Validità minima garantita
- 1 mese
- Norme
- ISO 11290
Palcam Agar si basa sulla formulazione descritta inizialmente da van Netten et al., che ha un'elevata selettività e dà una buona differenziazione delle colonie. La selettività si ottiene con l'aggiunta di cloruro di litio, acriflavina, polimixina B e ceftazidima, che inibiscono la crescita di quasi tutti i batteri accompagnatori Gram-negativi e della maggior parte dei Gram-positivi.
Caratteristiche principali
Isolamento selettivo di Listeria.
Clinico, alimenti.
ISO 11290.
20 piastre pronte da 90 mm con 21 ± 2 mL.
Descrizione e tecnica
Descrizione
Listeria idrolizza l'esculina in esculetina, che reagisce con il citrato ferrico ammonico producendo un precipitato scuro e colonie grigio-verdi con aloni beige. Se su questo terreno crescono colonie di enterococchi o di stafilococchi, si riconoscono facilmente, perché utilizzano il mannitolo e producono colonie e aloni gialli, in contrasto con il colore rosso ciliegia del terreno.
Tuttavia, quando le colonie di Listeria sono molte, tutto il terreno si scurisce e questo può interferire con la differenziazione. In questi casi è consigliabile eseguire l'inoculo con un campione più diluito.
Tecnica
Seminare Palcam Agar con la crescita di un brodo di arricchimento primario (UVM I o Lovett) o di un brodo di arricchimento secondario (UVM II o Fraser). Incubare in atmosfera microaerofila per 48 ore a 37 °C.
In queste condizioni le colonie di Listeria hanno un diametro di circa 2 mm e sono di colore grigio-verde, con centro e alone neri. Le colonie di Enterococcus e di Staphylococcus sono più grandi, grigie con alone verde-bruno se non fermentano il mannitolo, e formano colonie gialle con alone giallo se lo fermentano. Le colonie presuntive di Listeria vanno confermate con prove biochimiche e sierologiche.
Presentazione
| Presentazione | 20 piastre pronte da 90 mm |
|---|---|
| Riempimento | 21 ± 2 mL |
| Confezione | 1 scatola con 2 confezioni da 10 piastre. Cellophane singolo. |
Composizione
| Componente | g/L |
|---|---|
| Triptone | 23,0 |
| Cloruro di litio | 15,0 |
| Mannitolo | 10,0 |
| Cloruro di sodio | 5,00 |
| Amido | 1,00 |
| Esculina | 0,80 |
| Citrato ferrico ammonico | 0,50 |
| D(+) glucosio | 0,50 |
| Rosso fenolo | 0,08 |
| Agar | 13,0 |
| Polimixina B | 0,01 |
| Acriflavina | 0,005 |
| Ceftazidima | 0,023 |
| Estratto di lievito | 3,00 |
Controllo qualità
Controllo fisico-chimico
| Colore | Rossastro |
|---|---|
| pH | 7,2 ± 0,2 a 25 °C |
Controllo microbiologico
Semina con l'ansa.
Secondo ISO 11290-1.
Aerobiosi. Incubazione a 37 ± 1 °C, lettura dopo 24-48 ± 2 h.
| Microrganismo | Crescita |
|---|---|
| Escherichia coliATCC 25922, WDCM 00013 | Inibito |
| L. monocytogenesATCC 13932, WDCM 00021 | Buona - esculina +. Terreno nero |
| L. monocytogenesATCC 35152, WDCM 00109 | Buona - esculina +. Terreno nero |
| Enterococcus faecalisATCC 29212, WDCM 00087 | Inibito |
Controllo di sterilità
Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.
Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.
(Base sterilizzata in autoclave con agitazione continua a 121 °C per 15 minuti - supplementi sterili aggiunti a 50 °C.)
Bibliografia
- ATLAS, R.M. (1993) Handbook of Microbiological Media. CRC Press Boca Raton Florida.
- ISO 11290 standard (1996) Microbiology of food and animal feeding stuff. Horizontal method for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes. Part 1 - Detection method. Part 2 - Enumeration method.
- ISO 11290-1:2017 Standard. Microbiology of the food chain. Horizontal method for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes and for Listeria spp. - Part 1: Detection Method.
- ISO 11290-2:2017 Standard. Microbiology of the food chain. Horizontal method for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes and for Listeria spp. - Part 2: Enumeration Method.
- ISO 11133:2014/Amd 1:2018. Microbiology of food, animal feed and water. Preparation, production, storage and performance testing of culture media.
- VANDERZANT, C. & D.F. SPLITTSTOESSER (1992) Compendium of methods for the microbiological examination of foods. APHA. Washington DC.
- Van NETTEN, P., J. PERALES, A. van de MOOSDUCK, G.D.W. CURTIS & D.A.A. MOSSEL (1989) Liquid and solid selective differential media for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes. Int. J. Food Microbiol. 8:299-316.
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