Terreni pronti all'uso
Bile Esculin Azide Agar
Terreno solido per la conferma e la conta degli enterococchi nelle acque con il metodo di filtrazione su membrana, secondo ISO 7899-2.
- Codice
- LC-952
- Categoria
- Terreni pronti all'uso
- Formato
- 20 piastre da 90 mm
- Controllo qualità ISO 17025
- Sì
- Conservazione
- da 2 a 14 °C
- Validità minima garantita
- 1 mese
- Norme
- ISO 7899-2
- Disponibile anche
- Terreno disidratato, 1 formato (LC-1005)
- Disponibile anche
- Terreno disidratato, 1 formato (LC-1372)
- Disponibile anche
- Terreno pronto all'uso, 1 formato (LC-4701)
Bile Esculin Azide Medium è una modifica del classico Bile Esculin proposto da Isenberg, Goldberg e Sampson nel 1970, ma con una quantità ridotta di bile e con l'aggiunta di sodio azide. Brodsky e Schiemann dimostrarono che questo terreno, noto anche come Enterococci Selective Medium, dava i risultati migliori con la tecnica di filtrazione su membrana.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Isolamento selettivo degli enterococchi.
Settori
Acque.
Norme
ISO 7899-2.
Presentazione
20 piastre pronte da 90 mm con 21 ± 2 mL.
Descrizione e tecnica
Descrizione
La formulazione attuale secondo la norma ISO 7899-2:2000 si usa per il secondo passaggio nella conferma e nella conta degli enterococchi nelle acque con il metodo di filtrazione su membrana. Le colonie selezionate prima su Slanetz Bartley Agar vanno confermate con una breve incubazione su Bile Esculin Azide Medium, per verificare l'idrolisi dell'esculina in un ambiente selettivo.
Tecnica
Dopo un'incubazione di 24-48 ore su Slanetz Bartley Agar, la membrana filtrante con le colonie tipiche si trasferisce con pinze sterili, senza capovolgerla, su una piastra preriscaldata di Bile Esculin Azide Agar. Dopo due ore di incubazione a 44 ± 0,5 °C si esamina la membrana filtrante. Tutte le colonie tipiche che mostrano un colore da bruno a nero nel terreno circostante si considerano positive e quindi enterococchi intestinali.
Una distribuzione eterogenea delle colonie o la presenza di microrganismi abbondanti e diversi possono interferire con la differenziazione delle colonie positive.
Dopo l'incubazione, contare tutte le colonie comparse sulla superficie dell'agar. Le colonie tipiche di Enterococcus sp. mostrano un alone di colore da bruno a nero.
Ogni laboratorio deve valutare i risultati secondo le proprie specifiche. L'isolamento presuntivo di Enterococcus va confermato con ulteriori prove microbiologiche e biochimiche.
Presentazione
| Presentazione | 20 piastre pronte da 90 mm |
|---|---|
| Riempimento | 21 ± 2 mL |
| Confezione | 1 scatola con 2 confezioni da 10 piastre. Cellophane singolo. |
Composizione
| Componente | g/L |
|---|---|
| Triptone | 17,00 |
| Peptone | 3,00 |
| Estratto di lievito | 5,00 |
| Bile | 10,00 |
| Cloruro di sodio | 5,00 |
| Esculina | 1,00 |
| Citrato ferrico ammonico | 0,50 |
| Sodio azide | 0,15 |
| Agar | 15,00 |
Controllo qualità
Controllo fisico-chimico
| Colore | Giallo |
|---|---|
| pH | 7,1 ± 0,1 a 25 °C |
Controllo microbiologico
Incubare le membrane filtranti (MF) con i microrganismi in SB a 37 °C per 24-48 h e trasferirle sul terreno BEA.
Aerobiosi. Incubazione a 44 °C per 2 h. Prova dell'esculina.
| Microrganismo | Crescita |
|---|---|
| Enterococcus faecalisATCC 19433, WDCM 00009 | Buona - reazione positiva all'esculina |
| Escherichia coliATCC 25922, WDCM 00013 | Inibito |
| Enterococcus faecalisATCC 29212, WDCM 00087 | Buona - reazione positiva all'esculina |
| Enterococcus faeciumATCC 6057, WDCM 00177 | Buona - reazione positiva all'esculina |
Controllo di sterilità
Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.
Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.
Bibliografia
- ATLAS, R.M. & L.C. PARKS (1993) Handbook of Microbiological Media. CRC Press. Boca Raton. Fla.
- BRODSKY M.H. & D.A. SCHIEMANN (1976) Evaluation of Pfizer Selective Enterococcus and KF media for recovery of fecal streptococci from water by membrane filtration. Appl. Environ. Microbiol. 31:695-699.
- ISENBERG, H.D., D. GOLDBERG & J. SAMPSON (1970) Laboratory studies with a Selective Enterococcus Medium. Appl. Microbiol. 20:433.
- ISO Standard 7899-2 (2000) Water Quality. Detection and enumeration of intestinal enterococci. Part 2: Membrane filtration method.
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