Bile Esculin Azide Agar ISO

Descrizione

La formulazione attuale secondo la norma ISO 7899-2:2000 si usa per il secondo passaggio nella conferma e nella conta degli enterococchi nelle acque con il metodo di filtrazione su membrana. Le colonie selezionate prima su Slanetz Bartley Agar vanno confermate con una breve incubazione su Bile Esculin Azide Medium, per verificare l'idrolisi dell'esculina in un ambiente selettivo.

Tecnica

Dopo un'incubazione di 24-48 ore su Slanetz Bartley Agar, la membrana filtrante con le colonie tipiche si trasferisce con pinze sterili, senza capovolgerla, su una piastra preriscaldata di Bile Esculin Azide Agar. Dopo due ore di incubazione a 44 ± 0,5 °C si esamina la membrana filtrante. Tutte le colonie tipiche che mostrano un colore da bruno a nero nel terreno circostante si considerano positive e quindi enterococchi intestinali.

Una distribuzione eterogenea delle colonie o la presenza di microrganismi abbondanti e diversi possono interferire con la differenziazione delle colonie positive.

Controllo fisico-chimico

Controllo microbiologico

Incubare le membrane filtranti (MF) con i microrganismi in SB a 37 °C per 44 ± 4 h e trasferirle sul terreno BEA.

Aerobiosi. Incubazione a 44 °C per 2 h. Prova dell'esculina.

Controllo microbiologico secondo ISO 11133:2014/Amd 1:2018; A2:2020.

Controllo di sterilità

Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.

Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.

• ATLAS, R.M. & J.W. SNYDER (1995) Handbook of Media for Clinical Microbiology. CRC Press. Boca Raton, Fla, USA.
• ALVAREZ, M.V., E. BOQUET, I. de FEZ (1988) Manual de Técnicas en Microbiologia Clínica. AEFA, San Sebastian.
• BRODSKY M.H. & D.A. SCHIEMANN (1976) Evaluation of Pfizer Selective Enterococcus and KF media for recovery of fecal streptococci from water by membrane filtration. Appl. Environ. Microbiol. 31:695-699.
• CHAPIN, K.C. & T-L. LAUDERDALE (2003) Chap. 27: Reagents, Stains and Media: Bacteriology in Manual of Clinical Microbiology 8th edition Volume 1, edited by Murray-Baron-Jorgensen-Pfaller-Yolken. ASM. Washington DC, USA.
• FORBES, B.A., D.F. SAHM, & A.S. WEISSFELD (1998) Bailey & Scott's Diagnostic Microbiology 10th edition. Mosby. St. Louis. USA.
• ISENBERG, H.D., D. GOLDBERG & J. SAMPSON (1970) Laboratory studies with a Selective Enterococcus Medium. Appl. Microbiol. 20:433.
• ISENBERG, H. D. (1992) Clinical Microbiology Procedures Handbook, Volume 1. ASM Press, Washington USA.
• ISO Standard 7899-2 (2000) Water Quality. Detection and enumeration of intestinal enterococci. Part 2: Membrane filtration method.
• ISO 11133:2014/Amd 1:2018/Amd 2:2020. Microbiology of food, animal feed and water. Preparation, production, storage and performance testing of culture media.
• MURRAY, P.R., E.J. BARON, J.H. JORGENSEN, M.A. PFALLER & R.H. YOLKEN (2003) Manual of Clinical Microbiology 8th Edition, Volume 1, ASM Press, Washington DC., USA.
• McFADDIN, J.F. (1985) Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria. Volume 1. Williams & Wilkins. Baltimore. USA.
• PRATT-RIPPIN, K. & M. PEZLO (1992) Identification of Commonly Isolated Aerobic Grampositive Bacteria, in Clinical Microbiology Procedures Handbook, Volume 1 edited by H. D. Isenberg, ASM Press, Washington USA.
• RUOFF, K.L., R.A. WHILEY & D. BEIGHTON (2003) Chap. 29: Streptococcus in Manual of Clinical Microbiology 8th edition Volume 1, edited by Murray-Baron-Jorgensen-Pfaller-Yolken. ASM. Washington DC, USA.
• WINN, W. Jr., S. ALLEN, W. JANDA, E. KONEMAN, G. PROCOP, P. SCHRECKENBERGER, G. WOODS (2006) Koneman's Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th Edition. Lippincott Williams & Wilkins. Philadelphia. USA.
• UNE-EN ISO 11133 (2014). Microbiología de los alimentos para consumo humano, alimentación animal y agua - Preparación, producción, conservación y ensayos de rendimiento de los medios de cultivo.