Listeria Chromogenic Agar Base acc. to Ottaviani&Agosti (ALOA) ISO

Descrizione

L'identificazione specifica si ottiene con L-beta-fosfatidilinositolo, che fa da substrato per una fosfolipasi C presente solo in Listeria monocytogenes e in alcuni ceppi di Listeria ivanovii.

La combinazione dei due substrati permette di distinguere L. monocytogenes, che forma colonie di colore blu-verde ma circondate da una zona opaca, dalle altre specie di Listeria, che crescono con colonie blu-verdi senza alone. Questa differenziazione è evidente dopo l'incubazione delle piastre per 24 ± 2 ore a 37 °C.

A volte, soprattutto con campioni molto contaminati, possono crescere alcune colonie, di colore bianco, che non sono Listeria. In questo caso si raccomanda un passaggio di arricchimento prima dell'inoculo delle piastre.

Osservazioni: anche la maggior parte dei ceppi di Listeria ivanovii produce un alone opaco intorno alle colonie dopo 48 h di incubazione. Questa evidenza presuntiva va confermata con le prove di identificazione biochimiche o sierologiche (fermentazione degli zuccheri ramnosio / xilosio, prove di emolisi, CAMP test, ecc.) o con qualsiasi prova che confermi la specie senza incertezze.

Tecnica

Esistono molte metodologie standardizzate (ISO, FDA-BAM, AOAC, AFNOR, ecc.). Il tecnico deve seguire il protocollo convalidato nel suo laboratorio.

Incubare le piastre non capovolte, in aerobiosi, a 37 °C per 24-48 h.

Dopo l'incubazione, le colonie comparse sulla superficie dell'agar hanno questi aspetti:

• L. monocytogenes - colonie blu-verdi circondate da un alone opaco.
• L. innocua - colonie blu-verdi senza alone opaco.
• Altri batteri - blu, incolori o completamente inibiti, senza alone.

Controllo fisico-chimico

Controllo microbiologico

Semina a spirale: intervallo pratico 100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC (produttività) / 10⁴-10⁶ UFC (selettività).

Controllo microbiologico secondo ISO 11133:2014/Amd 1:2018.

Aerobiosi. Incubazione a 37 ± 1 °C, lettura dopo 24-48 ± 2 h.

Controllo di sterilità

Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.

Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.

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