Terreni disidratati
Lysine Decarboxylase Broth
Per l'identificazione dei microrganismi, in particolare dei bacilli enterici, in base alla decarbossilazione della lisina.
- Codice
- LC-1208
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
- Norme
- ISO 10273
- Disponibile anche
- Terreno pronto all'uso, 1 formato (LC-4229)
Lysine Decarboxylase Broth si usa per rilevare e differenziare gli enterobatteri dagli altri microrganismi, in base alla decarbossilazione della lisina.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Differenziazione degli enterobatteri.
Settori
Alimenti, acque.
Norme
ISO 10273.
Preparazione
14 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
Il peptone di gelatina fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il destrosio è il carboidrato fermentabile. Il porpora di bromocresolo è l'indicatore di pH. La lisina è aggiunta per rilevare la produzione dell'enzima specifico.
Quando il terreno è inoculato con un batterio capace di fermentare il destrosio, l'acido prodotto abbassa il pH del terreno e fa virare il colore dell'indicatore dal porpora al giallo. La condizione acida stimola anche l'attività decarbossilasica. I batteri che decarbossilano la L-lisina a cadaverina si riconoscono dalla presenza di un colore rosso porpora. La produzione di queste ammine innalza il pH del terreno. Un colore giallo dopo 24 ore indica un risultato negativo.
Sostituendo la L-lisina con l'arginina o l'ornitina, il nuovo terreno che si ottiene (Falkow Broth Base) si può usare per studiare la decarbossilazione di questi aminoacidi.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige chiaro |
| Colore del terreno preparato | Violetto |
| pH finale (25 °C) | 6,8 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 14 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Porpora di bromocresolo | 0,02 |
| Destrosio | 1 |
| Peptone di gelatina | 5 |
| L-lisina | 5 |
| Estratto di lievito | 3 |
Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 14 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire quantità di 5 mL in provette con tappo a vite. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Lasciare i tappi allentati per permettere lo scambio dei gas. Chiudere bene dopo la sterilizzazione.
Istruzioni per l'uso
- Inserire delicatamente nella provetta l'ansa da inoculo con il campione e muovere l'ansa avanti e indietro più volte per inoculare il terreno.
- Incubare a 35 ± 2 °C per 24 ore.
- Viraggio del colore al porpora: reazione di decarbossilazione positiva (Escherichia, Klebsiella, Salmonella tranne S. paratyphi, Arizona, Alkalescens-Dispar, Serratia).
- Colore giallo: reazione di decarbossilazione negativa (Proteus, Providencia, S. paratyphi A, Shigella, Aeromonas, Citrobacter).
Controllo qualità
Prova microbiologica
Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 18-48 h.
| Microrganismo | Reazione caratteristica |
|---|---|
| Proteus vulgarisATCC 13315 | Decarbossilazione della lisina (-) |
| Escherichia coliATCC 25922 | Decarbossilazione della lisina (+) |
| Serratia liquefaciensATCC 27592 | Decarbossilazione della lisina (+) lenta |
| Salmonella paratyphiATCC 9150 | Decarbossilazione della lisina (-) |
Bibliografia
- Falkow A. S. Clin. Path. 28:598, 1958.
- Ewing, Davis and Deaves, Studies in the Serratia Group. U.S. Dept. H.E.W., C.D.C. Atlanta, 1972.
- Edwards and Ewing. Identification of Enterobacteriaceae, Burgess Publ. Co. Minneapolis, Minn., 1961.
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