Terreni disidratati
MRS Agar Low pH ISO
Terreno raccomandato per la crescita dei lattobacilli in generale.
- Codice
- LC-1433
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 8 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
- Norme
- ISO 11133ISO 15214
- Disponibile anche
- Terreno pronto all'uso, 2 formati (LC-813)
MRS Agar Low pH è un terreno selettivo che sostiene una buona crescita dei lattobacilli in generale.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Conta selettiva dei lattobacilli.
Settori
Bevande alcoliche, prodotti lattiero-caseari, alimenti.
Norme
ISO 11133, ISO 15214.
Preparazione
66 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 12 minuti.
Principio e uso
Il terreno è adatto alla crescita dei batteri lattici, tra cui Lactobacillus, Pediococcus e Leuconostoc.
Il citrato di ammonio, a pH basso, inibisce la maggior parte dei microrganismi ma permette la crescita dei lattobacilli. Il fosfato dipotassico e l'acetato di sodio sono agenti tampone che mantengono il pH basso. Il Tween 80 è un emulsionante. I solfati di manganese e di magnesio sono fonti di ioni e di solfato. Il peptone di caseina e l'estratto di manzo forniscono azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il destrosio è il carboidrato fermentabile. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.
La crescita di alcuni ceppi di lattobacilli è inibita a un pH superiore a 6,0 ed è necessario acidificare il terreno per favorire la crescita. Con un pH di 5,7 ± 0,1, questo terreno favorisce la crescita di questi ceppi.
La norma ISO 15214 raccomanda questo terreno per la conta dei batteri lattici mesofili con la tecnica di conta delle colonie a 30 °C.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Ambra, leggermente opalescente |
| pH finale (25 °C) | 5,7 ± 0,1 |
| Quantità per litro | 66 g |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Digerito enzimatico di caseina | 10 |
| Glucosio | 20 |
| Agar batteriologico | 12 |
| Solfato di magnesio eptaidrato | 0,2 |
| Acetato di sodio | 5 |
| Tween 80 | 1,08 |
| Estratto di lievito | 4 |
| Idrogenofosfato dipotassico | 2 |
| Citrato triammonico | 2 |
| Solfato di manganese tetraidrato | 0,05 |
| Estratto di carne | 10 |
Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 66 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 12 minuti. Raffreddare a 47 °C, mescolare bene e distribuire in piastre.
Secondo ISO 15214
Per la conta dei batteri lattici mesofili secondo ISO 15214:
- Preparare il campione iniziale e le diluizioni seriali.
- Trasferire 1 mL di campione in ognuna di due piastre di Petri sterili. Ripetere il procedimento con il campione diluito.
- Versare in ogni piastra di Petri 15 mL di terreno MRS precedentemente raffreddato a 47 °C.
- Lasciar solidificare le piastre e incubarle capovolte a 30 °C per 72 ± 3 ore. Evitare l'essiccamento dell'agar durante l'incubazione, in modo che il terreno non diventi troppo inibitorio.
Al posto della procedura per inclusione si può applicare la semina in superficie, in combinazione con l'incubazione in condizioni anaerobiche o microaerobiche.
Controllo qualità
Secondo ISO 11133
Condizioni di incubazione: 30 ± 1 °C / 72 ± 3 h.
Condizioni di inoculo: produttività quantitativa (100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC) / selettività (10⁴-10⁶ UFC) / specificità (10³-10⁴ UFC).
Terreno di riferimento: lotto di terreno MRS già validato.
| Microrganismo | Specifica | Reazione caratteristica |
|---|---|---|
| Bacillus cereusATCC 11778 | Inibizione totale (0) | |
| Lactobacillus sakeiATCC 15521 | Crescita buona (2), > 70 % | Colonie caratteristiche secondo ciascuna specie |
| Lactococcus lactis ssp. lactisATCC 19435 | Crescita buona (2), > 70 % | Colonie caratteristiche secondo ciascuna specie |
| Escherichia coliATCC 25922 | Inibizione totale (0) |
Bibliografia
- ISO 15214: Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the enumeration of mesophilic lactic acid bacteria - Colony-count technique.
- ROGOSA, M., a. SHARPE, M.E.: An approach to the classification of the lactobacilli. - J. Appl. Bact., 22; 329-340 (1959).
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