MRS Agar Low pH ISO

Descrizione

L'alta qualità dei peptoni e dei supplementi, estratti di carne e di lievito, fornisce i fattori di crescita necessari per fare di MRS uno dei terreni più completi per la coltivazione dei lattobacilli. La selettività però è scarsa e il terreno tende spesso ad avere contaminanti, che richiedono una selezione maggiore. Per questo si raccomandano trapianti alternati su terreno solido a doppio strato e in brodo. In molti casi la crescita è favorita da un'atmosfera arricchita di CO₂.

Il terreno MRS è particolarmente adatto alla conta e al mantenimento dei lattobacilli in piastra, con inoculo in massa e copertura con un secondo strato di terreno fuso, che di solito evita la necessità dell'atmosfera arricchita di CO₂, soprattutto nel primo isolamento.

Tecnica

Raccogliere, diluire e preparare campioni e volumi secondo le specifiche, le direttive, le norme ufficiali e/o i risultati attesi.

Fondere il terreno contenuto nei flaconi a bagnomaria o nel forno a microonde, evitando di surriscaldarlo, prima di versarlo in piastre di Petri una volta raffreddato a temperatura ambiente.

Una volta solidificato su una superficie piana, seminare la piastra per striscio o con il metodo a spirale.

Incubare in atmosfera al 5 % di CO₂ a 30 ± 1 °C per 72 ± 3 h.

Dopo l'incubazione, contare tutte le colonie comparse sulla superficie dell'agar.

Ogni laboratorio deve valutare i risultati secondo le proprie specifiche.

Controllo fisico-chimico

Controllo microbiologico

Fusione - piastre per inclusione - inoculo: intervallo pratico 100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC (produttività) / 10⁴-10⁶ UFC (selettività).

Controllo microbiologico secondo ISO 11133:2014/Amd 1:2018.

Incubazione in microaerofilia a 30 ± 1 °C per 72 ± 3 h.

Controllo di sterilità

Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.

Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.

• DOWNES, F.P. & K. ITO (2001) Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods. 4th Ed. APHA. Washington DC. USA.
• FIL-IDF Standard 146 (2003) Yoghurt. Identification of characteristic micro-organisms.
• FIL-IDF Standard 192 (2006) Enumeration of presumptive Lactobacillus acidophilus on a selective medium. - Colony-count technique at 37 °C.
• IFU Method No 5 (1996) Lactic Acid Bacteria Count Procedure. Schweizerischer Obstverband. CH-6302 Zug.
• IFU Method No 9 (1998) Microbiological examination of potential spoilage micro-organisms of tomato products. Schweizerischer Obstverband. CH-6302 Zug.
• ISO Standard 11133 (2014) Microbiology of food, animal feed and water. Preparation, production, storage and performance testing of culture media.
• ISO Standard 15214 (1998) Horizontal method for the enumeration of mesophilic lactic acid bacteria - Colony count technique at 30 °C.
• ISO Standard 20128 (2006) Milk products. Enumeration of presumptive Lactobacillus acidophilus on a selective medium. - Colony-count technique at 37 °C.
• ISO Standard 9232 (2003) Yoghurt - Identification of characteristic microorganisms (Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus and Streptococcus thermophilus).
• MAN, J.C. de, ROGOSA, M. y SHARPE, M. Elisabeth (1960) A medium for the cultivation of lactobacilli. J. Appl. Bact.; 23:130.