Orange Serum Agar

Descrizione

Orange Serum Agar non è un agar differenziale, ma un terreno di coltura in cui l'estratto di arancia fornisce un ambiente acido favorevole, nel quale si possono recuperare i microrganismi acidurici, compresi quelli danneggiati dalla lavorazione degli alimenti. Il triptone è la fonte principale di carbonio e di azoto e fornisce condizioni di crescita ottimali. L'estratto di lievito fornisce le vitamine del complesso B, che stimolano la crescita, e il fosfato fornisce un tampone osmotico per la sopravvivenza delle cellule. Il destrosio è una fonte supplementare di carbonio e l'agar è un agente solidificante.

Tecnica

L'International Fruchtsaft-Union (IFU) raccomanda l'uso di Orange Serum Agar in diversi metodi standardizzati, con il metodo della conta in piastra:

1. Preparare diluizioni seriali di fattore 10 del campione con un diluente adatto, come Buffered Peptone Water.
2. Distribuire aliquote di 1 mL del campione diluito in piastre di Petri sterili.
3. Aggiungere 20 mL di terreno sterile fuso, raffreddato a 45 °C, e ruotare delicatamente la piastra per mescolare bene il campione e il terreno.
4. Lasciar solidificare e incubare a 30 ± 1 °C per 48 ore prima della conta. Se non c'è crescita, prolungare l'incubazione a 5 giorni, con lettura giornaliera, prima di dare un risultato negativo.

In genere le colonie di lieviti e muffe si distinguono dalla morfologia, mentre quelle dei batteri acidurici vanno colorate con il metodo di Gram ed esaminate al microscopio per essere classificate correttamente.

Controllo fisico-chimico

Controllo microbiologico

Fondere il terreno - preparare le piastre - semina a spirale: intervallo pratico 100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC (produttività).

Controllo microbiologico secondo ISO 11133:2014/Amd 1:2018.

Incubazione in microaerofilia a 30 ± 1 °C per 72 ± 3 h.

Controllo di sterilità

Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.

Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.

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