Supplementi e additivi
Oxidase Reagent
Reattivo per la rilevazione e la verifica della citocromo ossidasi batterica.
- Codice
- LC-6007
- Categoria
- Supplementi e additivi
- Formato
- 2 x 25 tamponi
- Conservazione
- da 2 a 14 °C
- Validità minima garantita
- 6 mesi
La base del test è la seguente: i citocromi sono emoproteine che agiscono come enzimi ossidanti nelle catene di trasporto degli elettroni della fosforilazione ossidativa. In genere i citocromi si trovano solo nei batteri aerobi, mentre gli anaerobi stretti non li presentano. La citocromo ossidasi presente anche nelle Enterobacteriaceae è composta dal citocromo a3. Tuttavia la sostanza che l'Oxidase Reagent è in grado di ridurre è il citocromo c; quindi il test determina solo la presenza del citocromo c ed è positivo solo per i batteri che hanno il citocromo c nella loro catena respiratoria.
Caratteristiche principali
Presentazione
2 buste metalliche da 25 tamponi.
Descrizione e tecnica
Tecnica
Impregnare un tampone con la colonia isolata da classificare, dopo 24 ore di incubazione su TSA o Nutrient Agar.
La lettura va fatta dopo 20-30 secondi. Il batterio è ossidasi positivo se il tampone mostra un colore rosso - rosso scuro - porpora.
Se la reazione nella colonia è molto lenta, va considerata negativa o molto debole, perché la comparsa tardiva del colore si deve più all'ossidazione spontanea che alla reale presenza del citocromo c.
Nota: si raccomanda di richiudere al più presto la busta con i tamponi rimasti, per proteggerli dalla luce e dall'ossidazione.
Presentazione
| Presentazione | 2 buste metalliche, 25 tamponi per confezione |
|---|---|
| Riempimento | Non applicabile |
| Confezione | 2 buste metalliche richiudibili contenenti 25 tamponi impregnati di reattivo per ossidasi. |
Composizione
| Componente | Quantità per tampone |
|---|---|
| N,N-dimetil-p-fenilendiammina | 10 mg |
Tecnica
Isolare su TSA o Nutrient Agar, poi identificare la coltura pura. Impregnare il tampone con una colonia.
Ossidasi +: la colonia diventa rosso granato.
Ossidasi -: colonia da incolore a leggermente rosa.
Nota: richiudere al più presto la busta con i tamponi rimasti, per proteggerli dalla luce e dall'ossidazione.
Controllo qualità
Controllo fisico-chimico
| Colore | Incolore |
|---|
Controllo microbiologico
Impregnare il tampone con una coltura pura isolata di recente.
Osservare il viraggio della colonia dopo 20-30 secondi.
| Microrganismo | Crescita |
|---|---|
| Escherichia coliATCC 25922, WDCM 00013 | Ossidasi negativo - da bianco a rosa |
| Ps. aeruginosaATCC 9027, WDCM 00026 | Ossidasi positivo - granato |
| Ps. aeruginosaATCC 27853, WDCM 00025 | Ossidasi positivo - granato |
Controllo di sterilità
Non applicabile.
Bibliografia
- BLAZEVIC, D.J., G.M. EDERER (1975) Principles of Biochemical Test in Diagnostic Microbiology. John Wiley Sons. NY.
- FORBES, B.A., D.F. SAHM, A.S. WEISSFELD (1998) Bailey & Scott's Diagnostic Microbiology. 10th ed. Mosby. St. Louis.
- GABY W.L., C. MARTLEY (1957) Practical laboratory test for the identification of Pseudomonas aeruginosa. J. Bact. 74(3):356-358.
- GORDON, J. & J.W. McLEOD (1928) The practical application of the direct oxidase reaction in bacteriology. J. Pathol. Bacteriol 31(2):185-190.
- HARRIGAN, W.F. & M.E. McCANCE (1976) Laboratory Methods in Food and Dairy Microbiology. Academic Press. London.
- McFADDIN, J.F. (1999) Biochemical Tests for Identification of Medical Bacteria. 3rd ed. Lippincott Williams & Wilkins. Philadelphia. USA.
- STEEL, K.J. (1962) The oxidase activity of staphylococci. J. Appl. Bacteriol. 25(3):297-306.
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