Nucleasi e proteasi
Proteinase K powder, PCR grade
Serina proteasi ad ampio spettro in polvere liofilizzata, qualità PCR, >30 U/mg
- Codice
- M3036
- Categoria
- Nucleasi e proteasi
- Formati
- 3 formati
- Produttore
Proteinasi K ricombinante di Tritirachium album, prodotta in Pichia pastoris e fornita come liofilizzato bianco di qualità PCR. Questa proteasi simile alla subtilisina possiede un'elevata attività endo ed esoproteolitica non specifica e resta attiva in condizioni denaturanti e su un ampio intervallo di pH. Non mostra attività eso ed endonucleasiche né RNasi rilevabili ed è quindi adatta all'estrazione di DNA e RNA.
Caratteristiche principali
Attiva in condizioni denaturanti
SDS allo 0,2-1% e urea 1-4 M ne stimolano l'attività, un vantaggio nella lisi di cellule e tessuti.
Ampio intervallo operativo
Stabile da pH 4,0 a 12,5 con ottimo a pH 7,5-8,0; l'attività aumenta di più volte passando da 37 °C a 50-60 °C.
Qualità PCR
Nessuna attività esonucleasica, endonucleasica o RNasi rilevabile.
Facile da sciogliere
Solubile in acqua ad almeno 20 mg/mL per preparare soluzioni madre.
Applicazioni
- Isolamento di DNA genomico da cellule di mammifero e code di topo
- Preparazione rapida di stampi per PCR da colture cellulari
- Preparazione di DNA cromosomico per elettroforesi in campo pulsato (PFGE)
- Purificazione di mRNA prima della sintesi di cDNA
- Pulizia di prodotti di PCR e plasmidi prima del clonaggio o della trascrizione in vitro
- Inattivazione di RNasi e DNasi in saggi di protezione e di run-on
- Rimozione di contaminazioni proteiche
Specifiche tecniche
| Origine | Tritirachium album (Parengyodontium album), ricombinante, espressa in Pichia pastoris |
|---|---|
| Forma | Liofilizzato bianco |
| Attività | >30 U/mg di liofilizzato; >40 U/mg di proteina |
| Peso molecolare | Circa 27 kDa |
| Solubilità | ≥20 mg/mL in acqua |
| Condizioni ottimali | pH 7,5-8,0; 50-55 °C; rapida denaturazione sopra 65 °C; Ca2+ protegge dall'autolisi |
| Concentrazione d'uso | 0,05-1 mg/mL |
| Inibitori | PMSF, AEBSF; inattivazione a 95 °C per almeno 10 minuti |
| Contaminanti | Attività esonucleasica, endonucleasica e RNasi non rilevabili |
| CAS | 39450-01-6 |
| Conservazione | -20 °C; tollera brevi periodi a temperatura ambiente |
| Stabilità | Soluzione madre stabile 2 anni a -20 °C |
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