Nucleasi e proteasi
Ribonuclease A (RNase A), bovine pancreas
Endoribonucleasi da pancreas bovino ad alta attività, ≥70 U/mg, in polvere
- Codice
- S5231
- Categoria
- Nucleasi e proteasi
- Formati
- 1 formato
- Produttore
RNasi A da pancreas bovino di origine BSE-free, con attività minima di 70 unità Kunitz per mg. Taglia l'RNA a singolo filamento al 3' delle pirimidine e, a bassa concentrazione salina, anche l'RNA a doppio filamento e gli ibridi RNA:DNA. Non è certificata priva di DNasi: prima dell'uso in procedure con DNA si consiglia un trattamento termico di inattivazione delle DNasi.
Caratteristiche principali
Alta attività specifica
Almeno 70 U/mg (Kunitz).
Ampio intervallo operativo
Attiva da 15 a 70 °C (ottimo 60 °C) e da pH 6 a 10 (ottimo 7,6).
Inattivazione delle DNasi semplice
Si scioglie a 10 mg/mL in sodio acetato pH 5,2, si scalda a 100 °C per 15 minuti e si riporta il pH con Tris-HCl 1 M pH 7,4.
Origine controllata
Ottenuta da materiale bovino BSE-free.
Applicazioni
- Rimozione dell'RNA nelle preparazioni plasmidiche e nella purificazione del DNA, dopo inattivazione delle DNasi
- Saggi di protezione dalle RNasi
- Rimozione di RNA legato in modo aspecifico
- Analisi di sequenza dell'RNA
- Idrolisi dell'RNA in campioni proteici
- Generazione di estremità piatte su cDNA a doppio filamento
Specifiche tecniche
| Origine | Pancreas bovino, fonte BSE-free |
|---|---|
| Forma | Polvere |
| Attività | ≥70 U/mg (Kunitz) |
| Peso molecolare | Circa 13,7 kDa |
| DNasi | Non certificata priva di DNasi; inattivazione termica consigliata prima dell'uso |
| Condizioni ottimali | pH 7,6 (attiva a pH 6-10); 60 °C (attiva a 15-70 °C) |
| Concentrazione d'uso | 10 µg/mL per preparazioni plasmidiche (1 ora a temperatura ambiente); 100 ng/mL per cDNA a doppio filamento |
| Soluzioni madre | 1-10 mg/mL in 10 mM Tris-HCl pH 7,5 e 15 mM NaCl, oppure in TE |
| Inibitori | Inibitore delle RNasi, DEPC, guanidinio tiocianato 4 M, beta-mercaptoetanolo, metalli pesanti, complessi del vanadile |
| CAS | 9001-99-4 |
| Conservazione | +2/+8 °C |
| Spedizione | A temperatura ambiente |
| Stabilità | All'asciutto: diversi anni a +2/+8 °C; in soluzione: diversi anni a -20 °C, alcune settimane a +2/+8 °C |
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