Sabouraud Dextrose Broth EP/USP

Descrizione

Sabouraud USP Broth è formulato secondo la Farmacopea degli Stati Uniti, US NF e le linee guida 21 CFR. Nelle edizioni più recenti di questi metodi, per il controllo della sterilità dei prodotti farmaceutici iniettabili si può usare Tryptone Soy Broth. Questa formulazione è simile ad Antibiotic Medium No. 13 di Grove e Randall e alla linea guida 21 CFR.

Questo terreno non è selettivo, ma il pH basso inibisce la crescita dei microrganismi non acidofili. A causa di questa forte reazione acida e dell'elevato contenuto di glucosio, nella ricostituzione e nel riscaldamento del terreno si devono prendere misure particolari. È importante preriscaldare l'autoclave e raggiungere così il prima possibile la temperatura di sterilizzazione, altrimenti il glucosio caramellizza, scurendo il terreno e riducendone l'efficacia.

Tecnica

Questo terreno è raccomandato per l'uso in molte prove e saggi, ma da molto tempo è il terreno di elezione per verificare la sterilità dei prodotti farmaceutici sterili.

L'efficacia del terreno e l'assenza di prodotti fungistatici si verificano con un controllo positivo di Candida albicans. Un'ansa di una diluizione 1:1000 di una coltura fresca di 24 ore si aggiunge alla provetta di controllo e si incuba in modo adeguato. La prova di sterilità va eseguita in un terreno controllato e verificato. Per verificare l'attività fungistatica di un prodotto, preparare un inoculo della coltura di controllo come indicato sopra e inoculare due serie di provette di Sabouraud Broth come segue:

1. A una serie di provette aggiungere una quantità stabilita del prodotto da provare. Questa è la serie di prova.
2. A un'altra serie aggiungere solo l'inoculo. Incubare contemporaneamente le due serie di provette.
3. L'incubazione delle due serie di provette va eseguita a 20-22 °C per 10 giorni. Dopo questo periodo confrontare i risultati.

Se la serie di prova ha una crescita minore della serie di controllo, il prodotto ha attività fungistatica. Se la crescita è uguale o maggiore, non ha proprietà fungistatiche. Per il saggio quantitativo dell'attività fungistatica, eseguire il saggio con più serie a concentrazioni diverse, fino a un punto di crescita uguale nella serie di controllo e in quella di prova.

Controllo fisico-chimico

Controllo microbiologico

Inoculare con 10-100 UFC secondo le farmacopee armonizzate o con 10⁴-10⁶ UFC per la selettività.

Aerobiosi. Incubazione a 20-25 °C, lettura dopo 24-72 ore per i batteri e dopo 3-5 giorni per lieviti e muffe.

Controllo di sterilità

Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.

Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.

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