Sabouraud Dextrose Broth

Descrizione

Sabouraud USP Broth è formulato secondo la Farmacopea degli Stati Uniti, US NF e le linee guida 21 CFR. Nelle edizioni più recenti di questi metodi, per il controllo della sterilità dei prodotti farmaceutici iniettabili si può usare Tryptone Soy Broth. Questa formulazione è simile ad Antibiotic Medium No. 13 di Grove e Randall e alla linea guida 21 CFR.

Questo terreno non è selettivo, ma il pH basso inibisce la crescita dei microrganismi non acidofili. A causa di questa forte reazione acida e dell'elevato contenuto di glucosio, nella ricostituzione e nel riscaldamento del terreno si devono prendere misure particolari. È importante preriscaldare l'autoclave e raggiungere così il prima possibile la temperatura di sterilizzazione, altrimenti il glucosio caramellizza, scurendo il terreno e riducendone l'efficacia.

Tecnica

Raccogliere, diluire e preparare campioni e volumi secondo le specifiche, le direttive, le norme ufficiali e/o i risultati attesi. Se il contenitore originale è di grande volume, distribuire il terreno liquido in contenitori adatti.

Inoculare in modo asettico le provette con il campione preparato o con la sua diluizione.

Incubare le provette ben chiuse, in aerobiosi, a 20-25 °C per un massimo di 5 giorni.

(I tempi di incubazione, la temperatura e i volumi di campione possono variare a seconda del campione, delle specifiche, ecc.)

Leggere la torbidità (indicatore di crescita) e usare un qualsiasi terreno secondario di conferma per ottenere colonie isolate.

L'isolamento o il recupero presuntivo di lieviti e muffe va confermato con ulteriori prove microbiologiche e biochimiche.

Ogni laboratorio deve valutare i risultati secondo le proprie specifiche.

Calcolare la carica microbica totale per mL di campione moltiplicando il numero medio di colonie per piastra per l'inverso del fattore di diluizione, se è stato seminato un campione diluito. Riportare i risultati come unità formanti colonia (UFC) per mL o per g, insieme al tempo e alla temperatura di incubazione.

Controllo fisico-chimico

Controllo microbiologico

Preparare le provette - inoculo: intervallo pratico 10-100 UFC (produttività) secondo la Farmacopea Europea armonizzata.

Aerobiosi. Incubazione a 20-25 °C. Lettura a 2-3 giorni, fino a 5 giorni.

Controllo di sterilità

Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.

Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.

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