Terreni disidratati
Standard Methods Agar (PCA) ISO/APHA
Per la conta totale su piastra dei microrganismi aerobi.
- Codice
- LC-1056
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
- Norme
- APHAISO 11133ISO 4833
- Disponibile anche
- Terreno pronto all'uso, 4 formati (LC-903)
Standard Methods Agar (PCA) è raccomandato da APHA per la conta dei batteri di interesse sanitario, che sono indicatori di contaminazione o di carica microbica negli alimenti.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Conta non selettiva degli aerobi.
Settori
Prodotti lattiero-caseari, alimenti.
Norme
APHA, ISO 11133, ISO 4833.
Preparazione
23,5 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
Il digerito enzimatico di caseina fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il destrosio è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.
Questo terreno è raccomandato da ISO 4833 per la tecnica di conta delle colonie dei microrganismi a 30 °C nella filiera alimentare.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Tostato chiaro |
| Colore del terreno preparato | Ambra, leggermente opalescente |
| pH finale (25 °C) | 7,0 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 23,5 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Digerito enzimatico di caseina | 5 |
| Agar batteriologico | 15 |
| Glucosio anidro | 1 |
| Estratto di lievito | 2,5 |
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 23,5 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 44-47 °C e distribuire in contenitori adatti.
Istruzioni per l'uso
Per la conta delle colonie a 30 °C secondo ISO 4833:
Tecnica per inclusione:
- Inoculare 1 mL del campione (se necessario 2 diluizioni decimali successive, per poter contare tra 15 e 300 colonie per piastra).
- Versare in ogni piastra di Petri 12-15 mL di agar raffreddato a 44-47 °C. Il tempo di preparazione non deve superare 45 minuti.
- Capovolgere le piastre e incubare a 30 ± 1 °C per 72 ± 3 ore.
- Dopo l'incubazione, contare le colonie.
Tecnica di semina in superficie:
- Inoculare 0,1 mL del campione (se necessario 2 diluizioni decimali successive, per poter contare tra 15 e 300 colonie per piastra).
- Distribuire l'inoculo sulla superficie della piastra di agar.
- Lasciare le piastre chiuse con il coperchio per 15 minuti, perché l'inoculo sia assorbito dall'agar.
- Capovolgere le piastre e incubare a 30 ± 1 °C per 72 ± 3 ore.
- Dopo l'incubazione, contare le colonie.
Secondo APHA, incubare le piastre di Petri a 32 ± 2 °C per 18-48 ore e contare le colonie sviluppate. Per le applicazioni a campioni particolari consultare i testi specifici di APHA.
Controllo qualità
Secondo ISO 11133
Escherichia coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 6538 e Bacillus subtilis ATCC 6633.
Condizioni di incubazione: 30 ± 1 °C / 72 ± 3 h.
Condizioni di inoculo: produttività quantitativa (100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC).
Terreno di riferimento: TSA.
Secondo APHA
Escherichia coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 25923 e Staphylococcus epidermidis ATCC 12228.
Condizioni di incubazione: 32 ± 2 °C / 18-48 h.
| Microrganismo | Specifica |
|---|---|
| Staphylococcus epidermidisATCC 12228 | Crescita buona |
| Staphylococcus aureusATCC 25923 | Crescita buona |
| Staphylococcus aureusATCC 6538 | Crescita buona, > 70 % |
| Bacillus subtilisATCC 6633 | Crescita buona, > 70 % |
| Escherichia coliATCC 8739 | Crescita buona, > 70 % |
Bibliografia
- International Standard ISO 4833 Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the enumeration of microorganisms - Colony-count technique at 30 °C
- Standard Methods for the Examination of Dairy Products, 13th Ed. APHA, 1972. American Public Health Association.
- Recommended Methods for the Microbiological Examination of Foods, APHA Inc. New York, 1958.
- Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, APHA Inc. New York, 1960.
APHA: American Public Health Association Inc.
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