Estrazione e purificazione
Total RNA Purification Kit - Tissue
Kit con colonne mini spin per isolare RNA totale da tessuti freschi, congelati o inclusi in paraffina
- Codice
- GS5304
- Categoria
- Estrazione e purificazione
- Formati
- 1 formato
- Produttore
Kit per l'estrazione di RNA totale da 1-30 mg di tessuto fresco o congelato, fino a 25 mg di tessuto incluso in paraffina, e da cellule in coltura. Il campione viene omogeneizzato e lisato con guanidina tiocianato e detergenti, che insieme al beta-mercaptoetanolo inattivano le RNasi; l'RNA si lega alla membrana della colonna in presenza di sali caotropici, viene lavato in tre passaggi ed eluito con un tampone a bassa forza ionica o con acqua priva di RNasi. Il protocollo in 6 passaggi prevede la digestione con DNasi I direttamente su colonna.
Caratteristiche principali
Alta capacità di legame
Ogni colonna lega circa 230 µg di RNA, adatta anche a tessuti ricchi di acidi nucleici.
RNA puro
Rapporto A260/A280 compreso tra 1,7 e 1,9, con rimozione di contaminanti e inibitori enzimatici grazie al lavaggio in tre passaggi.
Protezione dalle RNasi
La lisi con guanidina tiocianato e beta-mercaptoetanolo inattiva rapidamente le RNasi endogene.
Conservazione semplice
Spedito non refrigerato e conservabile a temperatura ambiente.
Applicazioni
- RT-PCR e RT-qPCR
- Sintesi di cDNA
- Northern blot
- Primer extension
- Sequenziamento dell'RNA
- Analisi su microarray
Specifiche tecniche
| Campione | 1-30 mg di tessuto fresco o congelato; fino a 25 mg di tessuto incluso in paraffina; cellule in coltura |
|---|---|
| Principio | Colonne mini spin a membrana, lisi con guanidina tiocianato e detergenti |
| Capacità di legame | Circa 230 µg di RNA per colonna |
| Purezza | A260/A280 1,7-1,9 |
| Trattamento DNasi | Digestione con DNasi I su colonna |
| Eluizione | Tampone a bassa forza ionica o acqua priva di RNasi |
| Conservazione | Da +15 °C a +30 °C |
| Spedizione | Non refrigerata |
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