TSYEB Broth (Tryptone Soy Yeast Extract Broth) ISO

Il peptone di caseina e il peptone di soia forniscono azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B, essenziali per la crescita batterica. Il glucosio è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia. Il fosfato dipotassico agisce come sistema tampone. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico.

Preparazione

Sospendere 36 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in contenitori adatti e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.

Istruzioni per l'uso

Prova della motilità per la conferma di Listeria spp.:

1. Prelevare una colonia isolata e sospenderla in una provetta contenente TSYEB.
2. Incubare a 25 °C per 8-24 ore, finché il terreno diventa torbido.
3. Porre una goccia su un vetrino portaoggetti pulito per microscopio, coprire con il vetrino coprioggetti ed esaminare al microscopio.
4. Listeria spp. appare come bastoncini sottili e corti con motilità a capriola.
5. Le colture cresciute sopra 25 °C possono non mostrare questa motilità. Vanno sempre confrontate con una coltura nota.
6. Cocchi, bastoncini grandi o bastoncini con motilità rapida a nuoto non sono Listeria spp.

Prova dei carboidrati per la conferma di Listeria monocytogenes:

1. Inoculare ciascuno dei brodi ai carboidrati con una coltura in brodo TSYEB.
2. Incubare a 35 ± 2 °C per 18-48 ore.
3. La reazione positiva è indicata dal colore giallo (formazione di aldeide).

• ISO 11290-1:1999 Microbiology of food and animal feeding stuffs. Horizontal method for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes. Part 1: Detection method. Amendment 1: Modification of the isolation media and the haemolysis test and inclusion of precision data.