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Accessori per PCR

Uracil-DNA Glycosylase (UDG)

Enzima ricombinante per prevenire le contaminazioni da carry-over nella PCR con dUTP

Codice
M3096
Formati
2 formati

Uracil-DNA glicosilasi ricombinante di E. coli (26 kDa) che rimuove l'uracile dal DNA a singolo e doppio filamento. Se in tutte le PCR del laboratorio il dTTP viene sostituito con dUTP, un breve trattamento della nuova reazione con UDG elimina gli ampliconi contaminanti delle corse precedenti prima dell'amplificazione. L'enzima si inattiva a 95 °C e non agisce su oligonucleotidi di 6 basi o meno.

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CodiceFormatoPrezzo
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Caratteristiche principali

Protezione dal carry-over

1 unità per reazione, 10 minuti a 15-25 °C prima della PCR, degrada gli ampliconi contenenti uracile.

Inattivazione semplice

Un'incubazione di 10 minuti a 95 °C inattiva l'enzima.

Primer al sicuro

Non rimuove l'uracile da oligomeri di 6 basi o meno.

Prodotti riutilizzabili

I prodotti con dU servono come bersagli di ibridazione e stampi di sequenziamento e si clonano in ospiti privi di UNG.

Applicazioni

  • Prevenzione delle contaminazioni da carry-over in PCR
  • Decontaminazione di reazioni allestite con dUTP
  • Rimozione dell'uracile da DNA a singolo e doppio filamento

Specifiche tecniche

Concentrazione10 U/µL
OrigineE. coli, ricombinante
Definizione di unità1 U rilascia 60 pmol di uracile al minuto da DNA a doppio filamento contenente uracile
Tampone di conservazione20 mM Tris-HCl pH 8,0, 50 mM NaCl, 0,1 mM EDTA, 50% glicerolo
Dosaggio1 U per reazione, 10 minuti a 15-25 °C prima della PCR
RequisitidUTP (200-600 µM) al posto del dTTP; con 500-600 µM di dUTP aumentare il MgCl2 di 2,5 mM
Inattivazione95 °C per 10 minuti
Conservazione-20 °C; prodotti di PCR a +2/+8 °C per poche ore o a -20 °C per periodi lunghi
SpedizioneSu ghiaccio

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