Antibiotic Medium No.3 USP

L'attività (potenza) di un antibiotico può essere dimostrata, in condizioni adatte, dal suo effetto inibitorio sui microrganismi. Una riduzione dell'attività antimicrobica può rivelare alterazioni non evidenziate dai metodi chimici.

Antibiotic Medium No. 3 si può usare con i seguenti metodi microbiologici per i saggi degli antibiotici:

1. Metodo per diluizioni seriali.
2. Metodo turbidimetrico.

Antibiotic Medium No. 3 si usa nel saggio di potenza di penicillina, eritromicina, neomicina, clortetraciclina e cloramfenicolo, ecc.

Questo terreno si può usare anche nella determinazione turbidimetrica. Il metodo turbidimetrico si basa sull'inibizione della crescita di una coltura microbica in un terreno liquido che contiene una soluzione uniforme di un antibiotico. L'uso di questo metodo è adatto solo quando i campioni in esame sono limpidi.

Il peptone, l'estratto di lievito e l'estratto di manzo forniscono azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. I fosfati di potassio agiscono da sistema tampone. Il glucosio è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.

Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.

Preparazione

Sospendere 20 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare a 121 °C per 15 minuti. Distribuire in contenitori adatti.

Istruzioni per l'uso

Saggio turbidimetrico:

1. Lavare la crescita di un agar inclinato fresco con Antibiotic Medium No. 3.
2. Diluire il brodo secondo necessità.
3. Seguendo le procedure di riferimento, preparare le diluizioni di lavoro dello standard di riferimento dell'antibiotico a concentrazioni specifiche.
4. Incubare le provette a 35 °C per 3-4 ore, poi bloccare la crescita con 0,5 mL di formalina diluita 1:3.
5. Leggere con uno spettrofotometro adatto e confrontare la crescita con le soluzioni dello standard di riferimento indicate.

• Grove and Randall. Assay Methods of Antibiotics, Medical Encyclopedia Inc. New York 1955.
• United States Pharmacopoeia Convention. 1955. The United States Pharmacopoeia, 23rd Ed. Biological Tests and Assays, p. 1690-1696. The United States Pharmacopoeia Convention, Rockville, Md.