Brilliant Green Agar (BGA) ISO

Descrizione

Poiché ha un'alta concentrazione di verde brillante, inibisce la crescita della maggior parte dei batteri, tranne Salmonella. Tuttavia anche S. typhi e S. paratyphi sono inibite. Quindi, quando si sospetta la loro presenza o quella di Shigella, si raccomanda di usare in parallelo altri terreni, come Deoxycholate Lactose Agar, MacConkey Agar, Salmonella-Shigella Agar, Xylose Lysine Deoxycholate Agar o Endo Agar Base, che sono meno inibenti.

La presenza di lattosio e saccarosio permette una buona differenziazione tra Salmonella, che forma colonie rosa o incolori con un alone o una zona rossa, e il microbiota di accompagnamento, che forma colonie più piccole, giallo-verdastre, con un alone giallo, per l'acido prodotto dalla fermentazione del lattosio e/o del saccarosio.

Osborn e Stokes suggerirono di aggiungere 0,08 g/L di sulfadiazina o 1 g/L di sulfapiridina per rendere questo terreno più selettivo per Salmonella e quindi più adatto all'analisi degli alimenti, delle uova e dei loro derivati.

Tecnica

Raccogliere, diluire e preparare campioni e volumi secondo le specifiche, le direttive, le norme ufficiali e/o i risultati attesi.

Seminare le piastre per striscio o con il metodo a spirale. Incubare le piastre non capovolte, in aerobiosi, a 30-35 °C per 24-48 ore (secondo i metodi).

(A seconda del campione, delle specifiche, ecc., possono essere necessari tempi di incubazione più lunghi di quelli indicati sopra o temperature di incubazione diverse. Questo terreno si può inoculare direttamente o dopo un brodo di arricchimento come MKTTn broth.)

Dopo l'incubazione, contare tutte le colonie comparse sulla superficie dell'agar.

Salmonella forma colonie da rosa a incolori con un alone rosso; la flora di accompagnamento forma colonie più piccole con aloni da verdastri a giallastri.

Ogni laboratorio deve valutare i risultati secondo le proprie specifiche.

L'isolamento presuntivo di Salmonella sp. va confermato con ulteriori prove microbiologiche e biochimiche.

Calcolare la carica microbica totale per mL di campione moltiplicando il numero medio di colonie per piastra per l'inverso del fattore di diluizione, se è stato seminato un campione diluito. Riportare i risultati come unità formanti colonia (UFC) per mL o per g, insieme al tempo e alla temperatura di incubazione.

Controllo fisico-chimico

Controllo microbiologico

Semina a spirale: intervallo pratico 100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC (produttività) / 10⁴-10⁶ UFC (selettività).

Aerobiosi. Incubazione a 35 ± 2 °C, lettura a 24-48 ore.

Controllo di sterilità

Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.

Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.

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