Calcium Caseinate Agar

Questo terreno contiene caseina, una fonte ricavata dal latte crudo, ricca di aminoacidi e azoto, che viene degradata dai microrganismi proteolitici e forma zone più chiare intorno alle colonie in un terreno altrimenti torbido. Il peptone di carne e l'estratto di manzo forniscono azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico. L'idrossido di calcio è l'inibitore. Il cloruro di calcio aiuta a mantenere il pH del terreno. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.

Preparazione

Sospendere 29,2 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in contenitori adatti e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Versare in piastre di Petri facendo ruotare il terreno per risospendere il precipitato. Se si desidera intensificare la torbidità del terreno, si possono aggiungere da 5 a 10 g di latte scremato in 1 L di terreno.

Istruzioni per l'uso

1. L'inoculo si può eseguire per striscio sulla superficie della piastra o con il metodo per inclusione.
2. Incubare a 35 ± 2 °C per 48-72 ore. La caseina viene degradata dai microrganismi proteolitici e forma zone chiare intorno alle colonie.
3. Il terreno finito è torbido, soprattutto se si aggiungono 5-10 g/L di latte in polvere.
4. Contare solo le colonie con zone di schiarimento.
5. Coprire la superficie della piastra con acido acetico al 5-10 % può migliorare la differenziazione delle colonie.

• Frazier, W.C. and Rupp, P. Studies on the proteolytic bacteria of milk. A medium for the direct isolation of caseolytic milk bacteria. J. Bact. 16: 57-63 (1928).