Modified Scholten’s Broth

I batteriofagi sono virus che possono infettare solo i batteri e replicarsi solo al loro interno. In molti casi si tratta di relazioni molto specifiche. I colifagi somatici infettano in modo specifico Escherichia coli e, nelle acque, indicano una contaminazione da feci umane o animali o da acque reflue che contengono tale materiale. Forniscono un metodo rapido e semplice per determinare l'inquinamento fecale nelle acque ambientali.

La capacità di Escherichia coli O157:H7 di indurre danni cellulari che portano alla malattia nell'uomo è legata a numerosi fattori di virulenza, soprattutto al gene stx, che codifica la tossina Shiga (Stx) ed è trasportato da un batteriofago. Si ritiene che la Stx sia responsabile della forma più grave dell'infezione, che causa la colite emorragica (HC) e la sindrome emolitico-uremica (HUS), potenzialmente mortali.

MSB si usa nella preparazione delle colture madre, di lavoro e di inoculo, per reidratare e arricchire l'ospite. Il risultato dell'infezione è la lisi della cellula e la produzione di placche visibili (zone chiare).

Preparazione

Sospendere 28 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in contenitori adatti e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.

Istruzioni per l'uso

1. Prelevare l'inoculo con un'ansa sterile.
2. Immergere l'ansa nel terreno e agitare delicatamente.
3. Incubare a 35 ± 2 °C per 24 ore.

Poi aggiungere il campione originale o le diluizioni che contengono il fago in provette di Modified Scholten's Agar semisolido (ssMSA), per inoculare in seguito una piastra di Modified Scholten's Agar (MSA).

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