BPRM Broth Base (Bacteroides Phage Recovery Medium)

Questo terreno permette una crescita batterica più rapida e dà rese di fagi più alte. Il peptone e il triptone forniscono azoto, vitamine, aminoacidi e i nutrienti per la crescita. Il glucosio è il carboidrato fermentabile, fonte di carbonio e di energia. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il cloruro di sodio mantiene l'equilibrio osmotico e il solfato di magnesio eptaidrato è l'agente tampone del terreno.

Con un'adeguata concentrazione di agar si può preparare un terreno semisolido o solido. Per inibire la flora di accompagnamento, aggiungere 100 mg/mL di kanamicina e 7,5 mg/mL di vancomicina sterilizzate per filtrazione.

Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.

Preparazione

Sospendere 29,42 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Aggiungere 1 mL di cloruro di calcio al 5 %. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in contenitori adatti e sterilizzare a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 45-50 °C. Aggiungere in condizioni asettiche 1 mL/litro di una soluzione sterile di emina all'1 % preparata in NaOH allo 0,02 %. Mescolare bene. Subito prima dell'uso, aggiungere 25 mL/litro di una soluzione sterile di carbonato disodico al 10,6 % (p/v). Portare il pH a 7,0 con HCl.

Istruzioni per l'uso

1. Prelevare l'inoculo con un'ansa sterile.
2. Immergere l'ansa nel terreno e agitare delicatamente.
3. Incubare a 44 ± 1 °C per 21 ± 3 ore.

• ISO 10705-4 Water quality - Detection and enumeration of bacteriophages - Part 4: Enumeration of bacteriophages infecting Bacteroides fragilis.
• Donia D., Divizia M., Panà A. Analysis of concentration methods for bacteriophages. Moderna, 1998, 109:1.
• Tartera C., Jofre J. Bacteriophages active against Bacteroides fragilis in sewage-polluted waters. Applied and Environmental Microbiology, 1987, 53, 1632.