Terreni disidratati
Mossel EE Broth EP/USP
Per l'arricchimento selettivo delle Enterobacteriaceae.
- Codice
- LC-1202
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
- Norme
- Farmacopea EuropeaUSP
- Disponibile anche
- Terreno pronto all'uso, 2 formati (LC-4043)
Mossel EE (Enterobacteriaceae Enrichment) Broth è un brodo di arricchimento, usato per favorire la crescita del gruppo delle Enterobacteriaceae, microrganismi che contaminano gli alimenti. La Farmacopea Europea e la USP, al paragrafo 2.6.13, "Esame microbiologico dei prodotti non sterili: prove per microrganismi specificati", raccomandano questo terreno per la ricerca dei batteri Gram-negativi tolleranti alla bile nei prodotti.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Arricchimento selettivo degli enterobatteri.
Settori
Controllo qualità del prodotto finito, alimenti, farmaceutico e veterinario.
Norme
Farmacopea Europea, USP.
Preparazione
45 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, scaldare a 100 °C per 30 minuti, non sterilizzare in autoclave.
Principio e uso
La conta delle Enterobacteriaceae è di grande importanza nel controllo delle condizioni igieniche degli alimenti. I microrganismi possono essere danneggiati durante la lavorazione degli alimenti, anche per esposizione a basse temperature, calore submarginale, essiccazione, radiazioni, conservanti o sanificanti. Il recupero dipende da un'adeguata rivitalizzazione delle cellule danneggiate. Escherichia coli, anche se presente in piccolo numero come contaminante negli alimenti, cresce facilmente in questo terreno.
Il digerito pancreatico di gelatina fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. Il glucosio è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia. Il fosfato disodico e il fosfato monopotassico agiscono come sistema tampone. Il verde brillante e la bile di bue sono agenti selettivi, che inibiscono i microrganismi Gram-positivi.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Verde |
| pH finale (25 °C) | 7,2 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 45 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Verde brillante | 0,015 |
| Digerito pancreatico di gelatina | 10 |
| Glucosio monoidrato | 5 |
| Diidrogenofosfato di potassio | 2 |
| Idrogenofosfato disodico diidrato | 8 |
| Bile di bue disidratata | 20 |
Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 45 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Scaldare a 100 °C per 30 minuti. Raffreddare subito. EVITARE DI SURRISCALDARE. NON STERILIZZARE IN AUTOCLAVE. Distribuire in contenitori adatti.
Istruzioni per l'uso
Per la prova dei microrganismi specificati (batteri Gram-negativi tolleranti alla bile) secondo la Farmacopea Europea:
- Preparare il campione con una diluizione 1 a 10 di non meno di 1 g del prodotto in Trypticasein Soy Broth (TSB) (LC-1224) e incubare a 20-25 °C per 2-5 ore.
- Per la prova di assenza, usare la diluizione preparata prima, corrispondente a 1 g del prodotto, per inoculare Mossel EE Broth e incubare a 30-35 °C per 24-48 ore.
- Trapiantare su piastre di Violet Red Bile Agar with Glucose (VRBG) (LC-1092) e incubare a 30-35 °C per 18-24 ore. Il prodotto è conforme alla prova se non crescono colonie.
- Per la prova quantitativa, usare la diluizione preparata prima, corrispondente a 0,1, 0,01 e 0,001 g del prodotto, per inoculare Mossel EE Broth e incubare a 30-35 °C per 24-48 ore.
- Trapiantare su piastre di Violet Red Bile Agar with Glucose (VRBG) (LC-1092) e incubare a 30-35 °C per 18-24 ore.
- La crescita di colonie costituisce un risultato positivo.
Controllo qualità
Secondo la Farmacopea Europea
Escherichia coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 6538 e Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027.
Condizioni di incubazione: 30-35 °C / 24-48 h.
Condizioni di inoculo: produttività (≤ 100 UFC) / proprietà inibitorie (≥ 100 UFC).
Altri ceppi
Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 18-48 h.
| Microrganismo | Specifica | Reazione caratteristica |
|---|---|---|
| Escherichia coliATCC 8739 + Enterococcus faecalis ATCC 19433 | ≥ 10 colonie su VRBG | Colonie da rosa a rosse, con o senza alone di precipitazione |
| Enterococcus faecalisATCC 29212 | Inibizione totale (0) | |
| Staphylococcus aureusATCC 6538 | Inibizione totale (0) | |
| Escherichia coliATCC 8739 | Crescita buona, torbidità | |
| Pseudomonas aeruginosaATCC 9027 | Crescita buona, torbidità |
Bibliografia
- Mossel D.A.A., Visser M. and Cornelissen A.M.R. J. App. Bact. 24:444. 1963.
- Mossel D.A.A. et al. J. Bact. 84:381. 1982.
- European Pharmacopoeia 9.0
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