Terreni pronti all'uso
Mossel EE Broth EP/USP
Terreno di coltura liquido usato per l'arricchimento degli enterobatteri secondo la norma ISO e il metodo armonizzato delle farmacopee.
- Codice
- LC-4043
- Categoria
- Terreni pronti all'uso
- Formati
- 2 formati
- Conservazione
- da 8 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 4 mesi
- Norme
- Farmacopea EuropeaUSP
- Disponibile anche
- Terreno disidratato, 1 formato (LC-1202)
Come suggerisce il nome, questo terreno serve all'arricchimento degli enterobatteri ed è una modifica di Mossel (1963) del classico Brilliant Green Bile 2% Broth. La sostituzione del lattosio con il glucosio lo rende più adatto alla rilevazione dei batteri enterici (sia produttori sia non produttori di gas) negli alimenti e in altri campioni.
Caratteristiche principali
Arricchimento selettivo degli enterobatteri.
Alimenti, farmaceutico e veterinario.
Farmacopea Europea, USP.
Prova di promozione della crescita secondo le monografie armonizzate delle farmacopee e ISO 11133:2014.
Descrizione e tecnica
Tecnica
La tecnica più comune è la seguente: il campione da studiare si aggiunge al brodo sterile in proporzione del 10 %. Dopo un'accurata omogeneizzazione, la miscela si incuba per 24-48 ore a 30-35 °C.
Dopo l'incubazione si eseguono trapianti su un terreno solido adatto all'isolamento selettivo degli enterobatteri (18-24 h).
Per questo passaggio si raccomanda Violet Red Bile Glucose Agar, ma si possono usare anche MacConkey, VRBLA o terreni a base di desossicolato o di verde brillante.
Le colonie presuntive isolate su questo terreno si possono verificare seguendo la metodologia abituale.
Nota: le temperature o i terreni di coltura possono variare secondo le norme adottate dal laboratorio.
Presentazione
| Codice | Presentazione | Riempimento | Confezione |
|---|---|---|---|
| LC-4043 | 20 provette da 16 x 113 mm | 9 ± 0,1 mL | Provette di vetro da 16 x 113 mm, etichettatura a inchiostro, tappo metallico non perforabile. 20 provette per scatola. |
| LC-5168 | 10 flaconi pronti da 125 mL | 100 ± 3 mL | 1 scatola con 10 flaconi da 125 mL. Tappo perforabile: sottotappo a vite in plastica. Si sconsiglia l'uso di aghi per siringa con diametro superiore a 0,8 mm. |
Composizione
| Componente | g/L |
|---|---|
| Peptone di gelatina | 10,000 |
| Destrosio | 5,000 |
| Bile di bue | 20,000 |
| Fosfato disodico (2H₂O) | 8,000 |
| Fosfato monopotassico | 2,000 |
| Verde brillante | 0,015 |
LC-5168, flaconi
| Componente | g/L |
|---|---|
| Peptone di gelatina | 10,000 |
| Glucosio monoidrato | 5,000 |
| Bile di bue disidratata | 20,000 |
| Fosfato disodico (2H₂O) | 8,000 |
| Fosfato monopotassico | 2,000 |
| Verde brillante | 0,015 |
Controllo qualità
Controllo fisico-chimico
| Colore | Verde scuro (LC-5168: verde) |
|---|---|
| pH | 7,2 ± 0,2 a 25 °C |
Controllo microbiologico
Prova di promozione della crescita secondo le monografie armonizzate delle farmacopee e i metodi di prova, e secondo ISO 11133:2014.
Aerobiosi. Incubazione a 30-35 °C. Lettura a 18-24 h.
| Microrganismo | Crescita |
|---|---|
| Ps. aeruginosaATCC 9027, WDCM 00026 | Buona. Recupero su VRBG |
| Salmonella typhimuriumATCC 14028, WDCM 00031 | Buona. Recupero su VRBG |
| Staphylococcus aureusATCC 6538, WDCM 00032 | Inibito |
| Escherichia coliATCC 8739, WDCM 00012 | Buona. Recupero su VRBG |
| Enterococcus faecalisATCC 19433, WDCM 00009 | Inibito |
LC-5168, flaconi: controllo microbiologico
Inoculo: 10-100 UFC secondo la Farmacopea Europea e 100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC (produttività) / 10⁴-10⁶ UFC (selettività) secondo ISO.
Metodologia analitica secondo ISO 11133:2014/Amd 1:2018; A2:2020.
Aerobiosi. Incubazione: 30-35 °C, lettura a 24 h (Farmacopea Europea) / 37 ± 1 °C, lettura a 24 h (ISO).
Nota: risultati ATCC 8739/6538/9027 (30-35 °C) (Farmacopea Europea) e ATCC 8739/14028/19433 (37 °C) (ISO).
| Microrganismo | Crescita |
|---|---|
| Escherichia coliATCC 8739, WDCM 00012 | Buona. Recupero su VRBG |
| Ps. aeruginosaATCC 9027, WDCM 00026 | Buona. Recupero su VRBG |
| Staphylococcus aureusATCC 6538, WDCM 00032 | Inibito |
| Enterococcus faecalisATCC 19433, WDCM 00009 | Inibito |
| Miscela E. coliATCC 8739 + E. faecalis ATCC 19433 | > 10 UFC. Colonie caratteristiche di E. coli |
| Miscela S. typhimuriumATCC 14028 + E. faecalis ATCC 19433 | > 10 UFC. Colonie caratteristiche di Salmonella |
Controllo di sterilità
Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.
Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.
Bibliografia
- EUROPEAN PHARMACOPOEIA 8.0 (2014) 8th ed. § 2.6.13. Microbiological examination of non-sterile products: Test for specified microorganisms. Harmonised Method. EDQM. Council of Europe. Strasbourg.
- ISO 21528-1:2004 Standard. Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal methods for the detection and enumeration of Enterobacteriaceae - Part 1: Detection and enumeration by MPN technique with pre-enrichment.
- ISO 11133:2014/Amd 1:2018. Microbiology of food, animal feed and water. Preparation, production, storage and performance testing of culture media.
- MOSSEL, VISSER & CORNELISSEN (1963) The examination of foods for Enterobacteriaceae using a test of the type generally adopted for the detection of salmonellae. J. Appl. Bact. 26:444-452.
- PASCUAL ANDERSON, Mª R. (1992) Microbiología Alimentaria. Díaz de Santos. S.A. Madrid.
- USP 33 - NF 28 (2011) <62> Microbiological examination of non-sterile products: Test for specified microorganisms. Harmonised Method. USP Corp. Inc. Rockville. MD. USA.
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