Terreni disidratati
MRS Agar
Per la crescita dei lattobacilli.
- Codice
- LC-1043
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 8 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
- Disponibile anche
- Terreno pronto all'uso, 3 formati (LC-943)
MRS Agar è un terreno selettivo, basato sulla formulazione sviluppata da de Man, Rogosa e Sharpe per ottenere un terreno che sostenesse una buona crescita dei lattobacilli in generale, ma in particolare dei ceppi che crescevano poco nei terreni esistenti, come L. brevis e L. fermenti, sostituendo un prodotto variabile (il succo di pomodoro).
Caratteristiche principali
Applicazioni
Arricchimento selettivo dei lattobacilli.
Settori
Bevande alcoliche, prodotti lattiero-caseari, alimenti.
Preparazione
62 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 12 minuti.
Principio e uso
Il terreno è adatto alla crescita dei batteri lattici, tra cui Lactobacillus, Pediococcus e Leuconostoc.
Il citrato di ammonio, a pH basso, inibisce la maggior parte dei microrganismi ma permette la crescita dei lattobacilli. Il fosfato dipotassico e l'acetato di sodio sono agenti tampone che mantengono il pH basso. Il Tween 80 è un emulsionante. I solfati di manganese e di magnesio sono fonti di ioni e di solfato. Il peptone batteriologico e l'estratto di manzo forniscono azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il destrosio è il carboidrato fermentabile. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.
I lattobacilli sono microaerofili e in genere richiedono piastre a strati per la coltivazione in aerobiosi su terreni solidi. Le colonie in profondità o in superficie possono essere compatte o piumose, e sono piccole, opache e bianche.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Ambra, leggermente opalescente |
| pH finale (25 °C) | 6,2 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 62 g |
| Conservazione | da 2 a 8 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Agar batteriologico | 10 |
| Peptone batteriologico | 10 |
| Destrosio | 20 |
| Fosfato dipotassico | 2 |
| Solfato di magnesio | 0,2 |
| Solfato di manganese | 0,05 |
| Estratto di manzo | 8 |
| Acetato di sodio | 5 |
| Tween 80 | 1 |
| Estratto di lievito | 4 |
| Citrato di ammonio | 2 |
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 62 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 12 minuti. Raffreddare a 45-50 °C, mescolare bene e distribuire in piastre.
Istruzioni per l'uso
Per la conta dei batteri lattici mesofili:
- Versare 1 mL del campione diluito in precedenza in una piastra di Petri sterile.
- Aggiungere un primo strato di terreno raffreddato (45-50 °C).
- Dopo la solidificazione, versare un secondo strato.
- Incubare le piastre fino a 3 giorni a 35 °C o fino a 5 giorni a 30 °C. Se possibile, incubare le piastre in atmosfera di CO₂.
- È importante mantenere un'atmosfera umida, perché le piastre non devono seccarsi durante l'incubazione.
- La crescita di alcuni ceppi di Lactobacillus è inibita a un pH superiore a 6,0 ed è necessario acidificare il terreno per favorire la crescita. Per acidificare il terreno si possono aggiungere alcune gocce di acido acetico.
Controllo qualità
Prova microbiologica
Condizioni di incubazione: 30 ± 1 °C / 72 ± 3 h.
Condizioni di inoculo: produttività quantitativa (100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC) / selettività (10⁴-10⁶ UFC).
Terreno di riferimento: lotto di MRS già validato.
| Microrganismo | Specifica |
|---|---|
| Lactobacillus sakeiATCC 15521 | Crescita buona, > 70 % |
| Lactococcus lactis ssp. lactisATCC 19435 | Crescita buona, > 70 % |
| Escherichia coliATCC 25922 | Crescita moderata |
Bibliografia
- Briggs M (1953) "An Improved Medium for Lactobacilli" J. Dairy Res. 20. 36-40.
- De Man, J.C. Rogosa, M., Sharpe, Elisabeth (1960) "A Medium for the Cultivation of Lactobacilli". J. Appl. Bact. 23. 130-135
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