Terreni disidratati
MRS Broth
Per la coltivazione e la conta di Lactobacillus spp.
- Codice
- LC-1215
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
MRS Broth è un terreno per la coltivazione e la conta di Lactobacillus spp. Ha la stessa formulazione di MRS Agar (LC-1043), senza l'agar come agente solidificante. Si usa quando si preferisce un terreno liquido.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Arricchimento selettivo e conta selettiva dei lattobacilli.
Settori
Bevande alcoliche, prodotti lattiero-caseari, alimenti.
Preparazione
52,25 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 12 minuti.
Principio e uso
È stato sviluppato da De Man, Rogosa e Sharpe per ottenere un terreno che permettesse una buona crescita dei lattobacilli, in particolare dei ceppi di L. brevis e L. fermenti, che crescevano poco nei terreni esistenti. Questo si è ottenuto sostituendo il succo di pomodoro di Tomato Juice Agar con altri nutrienti, creando un terreno adatto alla crescita dei batteri lattici, tra cui Lactobacillus, Pediococcus e Leuconostoc.
Il citrato di ammonio, a pH basso, inibisce la maggior parte dei microrganismi ma permette la crescita dei lattobacilli. Il fosfato dipotassico e l'acetato di sodio sono agenti tampone che mantengono il pH basso. Il Tween 80 è un emulsionante. I solfati di manganese e di magnesio sono fonti di ioni e di solfato. Il peptone batteriologico e l'estratto di manzo forniscono azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il destrosio è la fonte fermentabile di carbonio e di energia.
La crescita di alcuni ceppi di Lactobacillus è inibita a pH superiore a 6,0, quindi è necessario acidificare il terreno per favorire la crescita. Per acidificare il terreno si possono aggiungere alcune gocce di acido acetico.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Ambra limpido |
| pH finale (25 °C) | 6,2 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 52,25 g |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Peptone batteriologico | 10 |
| Destrosio | 20 |
| Fosfato dipotassico | 2 |
| Solfato di magnesio | 0,2 |
| Solfato di manganese | 0,05 |
| Estratto di manzo | 8 |
| Acetato di sodio | 5 |
| Tween 80 | 1 |
| Estratto di lievito | 4 |
| Citrato di ammonio | 2 |
Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 52,25 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in contenitori adatti e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 12 minuti.
Istruzioni per l'uso
- Prelevare l'inoculo con un'ansa sterile.
- Immergere l'ansa nel terreno e agitare delicatamente.
- Incubare a 35 °C per 3 giorni o a 30 °C per 5 giorni, in entrambi i casi in atmosfera arricchita di CO₂.
Controllo qualità
Prova microbiologica
Condizioni di incubazione: (35 °C / 3 giorni) o (30 °C / 5 giorni), in atmosfera arricchita di CO₂.
| Microrganismo | Specifica |
|---|---|
| Escherichia coliATCC 25922 | Crescita buona-moderata |
| Pseudomonas aeruginosaATCC 27853 | Crescita inibita |
| Lacticaseibacillus caseiATCC 393 | Crescita buona |
| Lactobacillus acidophilusATCC 4356 | Crescita buona |
| Lactobacillus fermentumATCC 9338 | Crescita buona-moderata |
Bibliografia
- Sharpe M. Elisabeth, Fryer T.F. and Smith D.G. (1966) "Identification of the Lactic Acid Bacteria in Identification Methods for Microbiologists Part A" (Gibbs B.M. and Skinner F.A. eds.) London and New York, Academic Press.
- Briggs M. (1953) J. Dairy Res., 20: 36-40
- Reuter G. (1985) Intern. J. Food Microbiol 2: 55-68.
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