Estrazione e purificazione
PureIT ExoZAP PCR CleanUp
Purificazione enzimatica dei prodotti di PCR in un solo passaggio, senza colonne né biglie
- Codice
- A620601
- Categoria
- Estrazione e purificazione
- Formati
- 4 formati
- Produttore
Miscela bilanciata di esonucleasi I termolabile e fosfatasi alcalina ricombinante di gamberetto per purificare i prodotti di PCR in un solo passaggio. L'esonucleasi degrada i primer residui e il DNA a singolo filamento, mentre la fosfatasi defosforila i dNTP in eccesso; il reagente si aggiunge direttamente alla reazione, funziona nei comuni tamponi di PCR e alla fine viene inattivato completamente al calore. Non servono colonne né biglie magnetiche e non si ha perdita di campione.
Caratteristiche principali
Protocollo di 5 minuti
Incubazione a 37 °C e inattivazione a 80 °C, nella stessa provetta della PCR.
Nessuna perdita di campione
Il prodotto di PCR resta tutto nella provetta, senza passaggi di legame ed eluizione.
Senza colonne né biglie
Basta aggiungere il reagente al prodotto di PCR.
Inattivazione completa
Il riscaldamento a 80 °C inattiva entrambi gli enzimi, che non interferiscono con le analisi successive.
Applicazioni
- Sequenziamento Sanger
- Reazioni di estensione del primer
- Analisi di SNP
- Preparazione di librerie NGS
Specifiche tecniche
| Composizione | Esonucleasi I termolabile (HL-ExoI) e fosfatasi alcalina ricombinante di gamberetto (rSAP) |
|---|---|
| Dosaggio | 2 µL per 5 µL di prodotto di PCR; aumentare in proporzione per volumi maggiori |
| Incubazione | 37 °C per 2-5 minuti |
| Inattivazione | 80 °C per 3-10 minuti |
| Conservazione | -20 °C; tenere in ghiaccio durante l'uso |
| Spedizione | In ghiaccio secco |
| Controllo qualità | Test funzionale con sequenziamento Sanger su prodotto di PCR addizionato di dNTP e primer; enzimi testati per attività endonucleasica su DNA a doppio e singolo filamento |
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