Raka-Ray Agar Base

Questi microrganismi possono modificare con i loro metaboliti le caratteristiche organolettiche della birra. La rilevazione è complicata dalle esigenze nutrizionali e ambientali di questi microrganismi. Per questi motivi sono state descritte diverse formulazioni per ottimizzare il terreno e ottenere una buona crescita.

Nelle prove comparative, con questo terreno si sono ottenute conte di lattobacilli più alte, perché contiene nutrienti e stimolanti della crescita come l'estratto di fegato, l'estratto di lievito, il triptone, la N-acetilglucosamina e il monooleato di sorbitano. Il maltosio e il fruttosio sono aggiunti come fonti di carboidrati quando alcuni lattobacilli non possono usare il glucosio. La selettività si ottiene aggiungendo 3 g/L di feniletanolo, per inibire i batteri Gram-negativi, e cicloesimide per inibire i lieviti. I solfati forniscono ioni inorganici. La betaina cloridrato è usata come agente stimolante della crescita. L'idrogenocitrato di diammonio e il fosfato di potassio sono agenti tampone. L'aspartato di potassio e il glutammato di potassio sono fonti aggiuntive di aminoacidi. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.

Lactobacillus fermentans cresce formando colonie bianco-crema. Se il numero di colonie su ogni piastra supera 300, diluire il campione 1:10 in soluzione fisiologica sterile e ripetere la prova.

Preparazione

Sospendere 77,2 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Aggiungere 10 mL di monooleato di sorbitano. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. NON SURRISCALDARE. Raffreddare a 45-50 °C e aggiungere in asepsi 3 grammi di feniletanolo. Mescolare bene e distribuire in piastre.

Istruzioni per l'uso

Tecnica a doppio strato:

1. Inoculare 0,1 mL del campione su piastre ben asciutte che contengono 15-20 mL di Raka-Ray Agar.
2. Distribuire sulla superficie del terreno con una bacchetta di vetro sterile.
3. Coprire la superficie con 4 mL di terreno sterilizzato fuso, raffreddato a 50 °C.
4. Incubare le piastre a 25-30 °C per 4-7 giorni.

A seconda del tipo di microrganismi, incubare o no in anaerobiosi.

• Methods of Analysis of the ASBC (1976) 7th Edition, The Society, St. Paul, Mn. USA.
• European Brewing Convention, EBC Analytica Microbiologica: Part II J. Inst. Brewing (1981) 87.303-321.