Rappaport Vassiliadis Broth EP/USP

Arricchimento di Salmonella

Raccogliere, diluire e preparare campioni e volumi secondo le specifiche, le direttive, le norme ufficiali e/o i risultati attesi.

Inoculare in modo asettico le provette/i flaconi con il campione preparato o con la sua diluizione, in proporzione 1/10 (V/V).

Incubare i flaconi ben chiusi, in aerobiosi, a 41,5 ± 1 °C per 24 ± 3 h (la Farmacopea raccomanda 30-35 °C).

(I tempi di incubazione, la temperatura e i volumi di campione possono variare a seconda del campione, delle specifiche, ecc.)

Leggere la torbidità (indicatore di crescita) e inoculare un qualsiasi terreno secondario di conferma, per striscio o con il metodo a spirale, come XLD, BPLS, ecc., per confermare i risultati. Dopo un'incubazione adeguata, contare tutte le colonie comparse sulla superficie dell'agar secondario.

L'isolamento o il recupero presuntivo di Salmonella va confermato con ulteriori prove microbiologiche e biochimiche.

Ogni laboratorio deve valutare i risultati secondo le proprie specifiche.

Calcolare la carica microbica totale per mL di campione moltiplicando il numero medio di colonie per piastra per l'inverso del fattore di diluizione, se è stato seminato un campione diluito. Riportare i risultati come unità formanti colonia (UFC) per mL o per g, insieme ai terreni di arricchimento e secondari usati, al tempo e alla temperatura di incubazione.

Osservazioni

• Il terreno refrigerato può presentare precipitati, che però non ne alterano le prestazioni.
• Il pH può aumentare leggermente durante la vita utile del terreno di coltura, ma questo non ne altera le prestazioni.

LC-5187, flaconi

Questo terreno di coltura è una modifica di Rappaport Vassiliadis Broth (ISO), con la composizione adattata alla formulazione proposta dalla Farmacopea Europea nella metodologia armonizzata e anche ai requisiti della Farmacopea Giapponese e della Farmacopea degli Stati Uniti.

I campioni fecali e le acque si possono arricchire direttamente in questo terreno. Per prodotti farmaceutici, alimenti e campioni ambientali si raccomanda una fase di pre-arricchimento in TSB o BPW. Per il tempo e le temperature di incubazione e per i trapianti e le prove di conferma, fare riferimento alla metodologia adatta (Farmacopea o norma ISO).

Controllo fisico-chimico

Controllo microbiologico

Inoculo: 50-100 UFC (produttività) secondo la Farmacopea Europea armonizzata.

Inoculare separatamente ogni ceppo in BPW come pre-arricchimento per 18 h.

Trapiantare 1:100 (V/V) dopo 24 h di incubazione nei brodi di pre-arricchimento.

LC-5187, flaconi: controllo microbiologico

Preparare le provette - inoculo: intervallo pratico 10-100 UFC (produttività) secondo la Farmacopea Europea armonizzata.

Aerobiosi. Incubazione a 30-35 °C. Lettura a 18-24 h.

Controllo di sterilità

Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.

Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.

• ATLAS, R.M. & L.C. PARKS (1993) Handbook of Microbiology Media. CRC Press Inc. London.
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• ISO 11133:2014/Amd 1:2018. Microbiology of food, animal feed and water. Preparation, production, storage and performance testing of culture media.
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