Salmonella Latex Test

Le particelle di lattice sono rivestite con antisieri polivalenti diretti contro un'ampia gamma di antigeni di Salmonella. Quando sono mescolate con una sospensione di microrganismi Salmonella, le particelle di lattice agglutinano rapidamente formando grumi visibili. Salmonella Latex Test rileva > 99 % delle specie mobili di Salmonella e le prime ricerche hanno indicato che si possono rilevare anche determinate specie non mobili.

Contenuto del kit (50 test)

• Salmonella Latex Reagent (F42a, 2,5 mL, tappo blu): particelle di lattice rivestite con antisiero di coniglio contro gli antigeni di Salmonella. Conservato con sodio azide allo 0,099 %.
• Controllo positivo (F42b, 0,5 mL, tappo nero): preparazione inattivata di antigeni di Salmonella, conservata con sodio azide allo 0,099 %.
• Soluzione fisiologica isotonica 0,85 % (M40, 5,0 mL, tappo bianco). Conservata con sodio azide allo 0,099 %.
• Vetrini per agglutinazione monouso (25 pz).
• Bastoncini per miscelazione monouso (2 x 25).

Materiale necessario non fornito

• Anse batteriologiche.

Salmonella Latex Test va conservato a 2-8 °C. Il kit non va usato dopo la data di scadenza stampata sulla confezione.

Prima di usare questo prodotto, leggere le sezioni Precauzioni e Limitazioni. I controlli indicati nella sezione Controllo qualità vanno eseguiti ogni volta che si usa il kit.

Campioni

Con Salmonella Latex Test si possono provare le colonie cresciute su piastre di agar selettivo.

Procedura del test

Per il protocollo del controllo positivo, vedi la sezione Controllo qualità.

1. Distribuire 1 goccia di soluzione fisiologica isotonica M40 in un cerchio di un vetrino per agglutinazione.
2. Con un'ansa da inoculo, prelevare una colonia dalla piastra di agar selettivo ed emulsionarla nella goccia di soluzione fisiologica fino a ottenere una sospensione densa e omogenea. Le sospensioni vanno preparate solo con colonie di morfologia simile a Salmonella spp.
3. Far oscillare delicatamente il vetrino per un massimo di 2 minuti e osservare se c'è autoagglutinazione o formazione di grumi. Se la sospensione resta omogenea, passare al passo 4 (vedi Limitazioni, nota 1).
4. Mescolare Salmonella Latex Reagent capovolgendolo delicatamente e aggiungerne una goccia accanto alla sospensione batterica. Il contagocce non deve toccare la sospensione.
5. Mescolare il reagente al lattice e la sospensione batterica con un bastoncino pulito e far oscillare delicatamente il vetrino due o tre volte. Non è necessario far oscillare eccessivamente il vetrino. Osservare se c'è agglutinazione entro un massimo di 2 minuti.
6. Dopo la lettura, eliminare in modo adeguato i bastoncini e i vetrini usati.

Interpretazione dei risultati

L'agglutinazione entro 2 minuti è un risultato positivo e indica la presenza di Salmonella nel campione. L'assenza di agglutinazione indica che Salmonella non è presente nella coltura provata.

Sicurezza

1. Il kit e i reagenti forniti sono destinati esclusivamente all'uso professionale, solo per la diagnostica industriale e non per l'uso in analisi cliniche.
2. La sodio azide, usata come conservante nei reagenti del kit, può reagire con le tubature di piombo o di rame formando azidi metalliche potenzialmente esplosive. Smaltire facendo scorrere un grande volume d'acqua, per evitare l'accumulo di azide.
3. Prendere le precauzioni adatte quando si manipolano o si smaltiscono potenziali patogeni. Il materiale infetto si può decontaminare con ipoclorito di sodio alla concentrazione finale del 3 % per 30 minuti. I rifiuti liquidi che contengono acidi vanno neutralizzati prima del trattamento.
4. Il controllo positivo è stato inattivato durante il processo di produzione. Va comunque manipolato come potenzialmente infetto.

Procedura

1. Salmonella Latex Test va usato secondo le istruzioni del kit.
2. Portare tutti i reagenti a temperatura ambiente prima dell'uso.
3. Non diluire nessuno dei reagenti del kit.
4. Non mescolare reagenti di lotti diversi di kit.
5. Non congelare nessuno dei reagenti del kit.
6. Il contagocce del reagente al lattice non deve toccare il controllo positivo o i campioni batterici.
7. Fare attenzione a registrare solo l'agglutinazione. Le reazioni "grumose" o "filamentose" possono non essere una vera agglutinazione.
8. Assicurarsi che il vetrino sia pulito e asciutto prima dell'uso.

1. I risultati vanno interpretati nel contesto di tutte le informazioni di laboratorio disponibili.
2. I ceppi rugosi di Salmonella provocano notoriamente un'autoagglutinazione aspecifica nella sola soluzione fisiologica e quindi non si possono provare con Salmonella Latex Test.
3. Alcuni ceppi non mobili possono non essere rilevati da Salmonella Latex Test.
4. Alcuni microrganismi ossidasi-positivi possono dare reazioni falsamente positive.
5. Le vecchie colture di riserva di Enterobacteriaceae su agar nutritivo inclinato possono provocare un'agglutinazione aspecifica, mentre le vecchie colture di riserva di Salmonella possono dare risultati falsamente negativi. Per la prova vanno preparate subcolture fresche.
6. L'identificazione con Salmonella Latex Test è presuntiva e tutti i risultati positivi vanno confermati con altre prove di identificazione e con la sierotipizzazione di colture pure.

I controlli seguenti vanno eseguiti ogni volta che si usa il kit.

1. Controllo dei reagenti: aggiungere una goccia di lattice per Salmonella (F42a) a una goccia di soluzione fisiologica M40 nello stesso cerchio di un vetrino. Mescolare e stendere il liquido su tutta l'area del cerchio con un bastoncino. Far oscillare delicatamente il vetrino per 2 minuti e osservare se c'è agglutinazione. Se si vede agglutinazione, il lattice o la soluzione fisiologica sono contaminati e vanno eliminati.
2. Controllo positivo: aggiungere una goccia di controllo positivo (F42b) in un cerchio del vetrino del test. Aggiungere una goccia di lattice per Salmonella nello stesso cerchio e mescolare. Il contagocce non deve toccare il controllo positivo. Far oscillare delicatamente il vetrino. Entro 2 minuti deve essere visibile un'agglutinazione, che indica un risultato positivo. Se non si vede agglutinazione, va usato un kit nuovo.

Smaltire secondo le norme locali, nazionali o regionali.