Mix per PCR e qPCR
SNP Pol DNA Polymerase 2X PCR Master Mix
Master mix 2x hot start ad alta discriminazione allelica per la genotipizzazione di SNP
- Codice
- M3061
- Categoria
- Mix per PCR e qPCR
- Formati
- 2 formati
- Produttore
Master mix 2x pronta all'uso che contiene la polimerasi ingegnerizzata ad alta discriminazione, un tampone di reazione ottimizzato e dNTP ultrapuri con una miscela bilanciata di dUTP e dTTP. La polimerasi non estende i primer con un mismatch al 3', quindi amplifica solo l'allele perfettamente appaiato, e un aptamero la mantiene inattiva sotto i 55 °C. Basta aggiungere primer e stampo, anche cellule intere, per eseguire PCR allele-specifica o real-time PCR con coloranti intercalanti.
Caratteristiche principali
Discriminazione fino al 100%
Rileva meno di 10 copie mutate su oltre 10.000 copie wild type nella PCR allele-specifica.
Tutto in una provetta
Polimerasi, tampone e dNTP già miscelati riducono i tempi di allestimento e gli errori di pipettamento.
Compatibile con UDG
La miscela di dUTP e dTTP permette il controllo delle contaminazioni da carry-over con uracil-DNA glicosilasi.
PCR diretta da cellule
50-500 cellule animali o di E. coli si usano direttamente, senza lisi separata né proteinasi K.
Applicazioni
- PCR allele-specifica (ASA) e genotipizzazione di SNP
- PCR metilazione-specifica (MSP)
- Tipizzazione HLA
- PCR multiplex
- Verifica di prodotti di editing CRISPR/Cas9
- Conferma di mutazioni puntiformi individuate per sequenziamento
- Real-time PCR con coloranti intercalanti
Specifiche tecniche
| Concentrazione | 2x (1x nella reazione finale) |
|---|---|
| Composizione | Polimerasi ad alta discriminazione con hot start ad aptamero, tampone ottimizzato, dNTP con miscela bilanciata di dUTP e dTTP |
| Hot start | Inibizione reversibile sotto i 55 °C; temperatura di annealing consigliata superiore a 57 °C |
| Lunghezza dell'amplicone | Ottimizzata per 60-200 bp; oltre 500 bp può servire MgCl2 aggiuntivo (0,5-2,0 mM) |
| Velocità di estensione | 0,5-1 kb/min a 72 °C |
| Attività | Nessuna attività esonucleasica 5'-3' o 3'-5' |
| Compatibilità | Coloranti intercalanti in real-time PCR; non adatta alle sonde di idrolisi |
| Conservazione | -20 °C; fino a 3 mesi a +2/+8 °C |
| Spedizione | Su ghiaccio |
| Controllo qualità | Test ASA sullo SNP genomico rs72921001 in DNA di cellule HeLa; attività regolata su stampo artificiale |
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