Terreni disidratati
SPS Agar (Sulfite Polymyxin Sulfadiazine)
Per l'isolamento e la conta di Clostridium perfringens da alimenti e da prodotti alimentari di ogni tipo.
- Codice
- LC-1082
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
- Disponibile anche
- Terreno pronto all'uso, 2 formati (LC-4255)
SPS Agar (Sulfite Polymyxin Sulfadiazine) è un terreno moderatamente selettivo per il recupero di Clostridium perfringens da alimenti freschi o conservati e da ingredienti alimentari.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Conta selettiva di Clostridium perfringens.
Settori
Alimenti.
Preparazione
39,7 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 118 °C per 15 minuti.
Principio e uso
Il terreno fu modificato da Angelotti, che aggiunse sulfadiazina e polimixina B solfato alla formula più recente di Mossel per il recupero di Clostridium perfringens.
Il peptone di caseina fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il citrato ferrico e il solfito di sodio sono indicatori di H₂S. C. perfringens riduce il solfito a solfuro, che a sua volta reagisce con il ferro e forma un precipitato nero di solfuro di ferro, visibile come colonie nere. La polimixina B solfato e la sulfadiazina inibiscono i microrganismi diversi da Clostridium spp. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.
Su SPS Agar crescono anche alcuni microrganismi diversi da C. perfringens, quindi è meglio eseguire una colorazione di Gram e cercare le spore. Molti microrganismi comuni sono inibiti del tutto o in parte, ma se si sviluppano in genere non formano colonie nere né spore, non riducono il nitrato e sono bacilli vegetativi Gram-positivi immobili.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Ambra, leggermente opalescente |
| pH finale (25 °C) | 7,0 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 39,7 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Agar batteriologico | 13 |
| Peptone di caseina | 15,5 |
| Polimixina B solfato | 0,01 |
| Solfito di sodio | 0,5 |
| Sulfadiazina | 0,12 |
| Estratto di lievito | 10 |
| Citrato ferrico | 0,5 |
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 39,7 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 118 °C per 15 minuti.
Istruzioni per l'uso
- Preparare i campioni del materiale in un omogeneizzatore, o con un'altra apparecchiatura, ed eseguire diluizioni seriali.
- Distribuire l'inoculo in una piastra di Petri sterile.
- Versare sull'inoculo il terreno raffreddato a 50-55 °C e mescolare delicatamente inoculo e terreno.
- È possibile distribuire il terreno in provette e inocularle per infissione.
- Incubare in anaerobiosi (gli autori hanno usato una miscela di azoto al 90 % e CO₂ al 10 %) a 35 ± 2 °C per 24-48 ore.
- L'assenza di motilità e la capacità di ridurre il nitrato si possono determinare su Indole Nitrate Medium (LC-1504) con l'aggiunta di 2 g/L di agar.
Controllo qualità
Prova microbiologica
Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 24-48 h.
| Microrganismo | Specifica | Reazione caratteristica |
|---|---|---|
| Clostridium perfringensATCC 13124 | Crescita buona | Colonia nera |
| Clostridium sporogenesATCC 19404 | Crescita moderata | Colonia nera |
| Escherichia coliATCC 25922 | Crescita inibita | |
| Staphylococcus aureusATCC 6538 | Crescita moderata/inibita | Colonia bianca |
Bibliografia
- Angelotti, Nall, Foter and Lewis. Applied Microbiol. 10: 193. 1962.
- Mossel. J. Sci. Agr. 10: 662. 1959.
- Mossel, de Bruin, Van Diepen, Vendrig and Zoutwelle. J. Applied Bact. 19: 142. 1956.
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