Antibiotic Medium No. 1 (Seed Agar) USP

L'attività (potenza) di un antibiotico può essere dimostrata, in condizioni adatte, dal suo effetto inibitorio sui microrganismi. Una riduzione dell'attività antimicrobica può rivelare alterazioni non evidenziate dai metodi chimici. I terreni per antibiotici sono identificati da numeri, secondo i nomi assegnati da Grove e Randall in "Assay methods of antibiotics". L'uso di terreni di coltura standardizzati e il controllo rigoroso di tutte le condizioni della prova sono requisiti essenziali nel saggio microbiologico degli antibiotici, per ottenere risultati soddisfacenti.

Questo terreno è raccomandato dalla USP e dalla Farmacopea Europea. Il saggio della neomicina si esegue con il metodo dei cilindri in piastra.

Questo terreno ha la stessa formula di Antibiotic Medium No. 11 (LC-1528), con la differenza che il pH del terreno è stato regolato a 6,6. Un terreno con un pH più alto e la stessa formula si usa per il saggio di eritromicina, carbomicina e neomicina.

Preparazione

Sospendere 30,5 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.

Istruzioni per l'uso

1. Liquefare il terreno e inocularlo a una temperatura adatta, per esempio da 48 °C a 50 °C, con una quantità nota di una sospensione di un microrganismo sensibile all'antibiotico da esaminare.
2. Agitare delicatamente la miscela per ottenere una distribuzione omogenea e versare subito in piastre di Petri una quantità di terreno inoculato tale da formare uno strato di 2-5 mm di spessore. In alternativa, il terreno può essere formato da 2 strati, di cui solo quello superiore inoculato.
3. Preparare una soluzione della sostanza di riferimento e una dell'antibiotico da esaminare, di concentrazioni note e di attività presunta uguale.
4. Applicare le soluzioni sulla superficie del terreno, per esempio in cilindri sterili di porcellana, di acciaio inossidabile, o in cavità preparate nell'agar.
5. In ogni cilindro o cavità va aggiunto lo stesso volume di soluzione.
6. In alternativa, usare un disco sterile di carta assorbente: impregnare i dischi con le soluzioni della sostanza di riferimento o con le soluzioni degli antibiotici da esaminare e porli sulla superficie dell'agar.

• Grove and Randall. Assay Methods of Antibiotics, Medical Encyclopedia Inc. New York 1955.
• United States Pharmacopoeia Convention. 1955. The United States Pharmacopoeia, 23rd Ed. Biological Tests and Assays, p. 1690-1696. The United States Pharmacopoeia Convention, Rockville, Md.
• European Pharmacopoeia 7.0