Gelatin Lactose Medium

La fermentazione del lattosio è indicata dalla presenza di bolle di gas e dal viraggio del colore del terreno dal rosso al giallo. La gelatina è una proteina ottenuta per idrolisi del collagene e si trova in abbondanza in ossa, pelle, tendini, cartilagini e tessuti animali. Si usa nei terreni di coltura per determinare la gelatinolisi da parte dei batteri; le gelatinasi prodotte dai microrganismi idrolizzano la gelatina e liquefanno un terreno solido. Il triptosio fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è una fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il lattosio è il carboidrato fermentabile e produce acido, evidenziato dall'indicatore rosso fenolo. Il rosso fenolo vira al giallo quando si produce acido e al rosso quando si produce un'alcalinizzazione del terreno. Crepe o bolle nel terreno indicano la produzione di gas.

Preparazione

Sospendere 155 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in contenitori adatti e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.

Istruzioni per l'uso

1. Inoculare e incubare a 35 ± 2 °C per 24-48 ore.
2. Per leggere la gelatinasi, refrigerare fino a raffreddamento completo e confrontare con provette non inoculate. Le provette positive per la gelatinasi restano liquide. C. perfringens di solito liquefa la gelatina dopo 24-44 ore.
3. Le colonie isolate che non sono mobili, riducono il nitrato, fermentano il lattosio e producono la liquefazione della gelatina in 48 ore si identificano in modo presuntivo come Clostridium perfringens.

Nota: non tutti i ceppi di Clostridium perfringens riducono il nitrato a nitrito.

• APHA. 3rd Edition Compendium of methods for the microbiological examination of foods.
• Métodos Analíticos del Laboratorio del Instituto Nacional del Consumo (CICC). Alimento I Ministerio de Sanidad y Consumo 1999.
• Department of Health NHS Executive: The Caldicott Committee. Report on the review of patient-identifiable information. London. December 1997.