EC Medium ISO

Questo terreno migliora i metodi di rilevazione del gruppo dei coliformi, in particolare di E. coli, e si usa per esaminare l'acqua potabile, gli impianti di trattamento delle acque reflue e in generale per il monitoraggio della qualità delle acque, oltre che per molluschi e altri alimenti. Si usa in molti Standard Methods per le analisi di alimenti e acque.

Il terreno si può usare a 35 ± 2 °C per la rilevazione dei microrganismi coliformi o a 44,5 °C per l'isolamento di E. coli.

I sali biliari agiscono da agente selettivo, inibendo i batteri Gram-positivi, i bacilli e gli enterococchi, ma permettendo lo sviluppo di E. coli. I sali di potassio hanno un'elevata capacità tampone. Il digerito enzimatico di caseina fornisce i nutrienti per la crescita e il lattosio è il carboidrato fermentabile, fonte di carbonio e di energia. Il cloruro di sodio mantiene l'equilibrio osmotico.

Preparazione

Sospendere 37 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in provette da 10 mL con campanelle di Durham per la raccolta e la rilevazione del gas. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. NON SURRISCALDARE.

Secondo ISO 7251

Per la rilevazione e la conta di E. coli presunto secondo ISO 7251:

1. Inoculare le provette di brodo di arricchimento selettivo (Lauryl Tryptose Broth, LC-1310) con la sospensione iniziale.
2. Per inoculi di 1 mL o meno, usare il terreno LTB a concentrazione singola.
3. Per inoculi di 10 mL o più, usare il terreno LTB a doppia concentrazione.
4. Incubare le provette di LTB a 37 °C fino a 48 h ed esaminare la produzione di gas dopo 24 h e 48 h.
5. Ogni provetta di LTB a doppia concentrazione che ha dato opacità, torbidità o emissione di gas, e ogni provetta di LTB a concentrazione singola che ha dato emissione di gas, si trapianta in una provetta contenente EC Medium.
6. Incubare le provette di EC Broth a 44 °C fino a 48 h ed esaminare la produzione di gas dopo 24 h e 48 h.
7. Ogni provetta di EC Medium che ha dato emissione di gas si trapianta in una provetta contenente Indole-Free Peptone Water (LC-1403) e si incuba a 44 °C per 48 h.
8. Le provette che mostrano opacità, torbidità o produzione di gas in LTB e i cui trapianti hanno prodotto gas in EC Medium e indolo in Peptone Water si considerano provette positive contenenti E. coli presunto.
9. Contare gli E. coli totali con il metodo MPN.

• Hajna and Perry 1944 A.P.H.A.
• Ray B. 1986 Impact of bacterial injury and repair in food microbiology. Its past, present and future. J. Food Prot.
• ISO 7251 Microbiology - General guidance for enumeration of presumptive Escherichia coli - Most probable number technique.