Desoxycholate Lactose Agar

I sali di desossicolato e di citrato inibiscono lo sviluppo dei microrganismi Gram-positivi. Il peptone batteriologico fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. Il lattosio è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico. Il rosso neutro è un indicatore di pH. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.

In generale si usa per la conta dei coliformi con il metodo delle diluizioni. Si aggiunge 1 mL della diluizione desiderata in una piastra di Petri vuota e vi si versa sopra il terreno raffreddato (45-50 °C). Se il prodotto da analizzare non è stato diluito (per esempio latte pastorizzato), si può aggiungere direttamente al terreno fuso e versare in piastre. Conviene aggiungere un secondo strato di terreno sulla piastra dopo la prima solidificazione.

Le colonie dei coliformi sono lenticolari, rosa o rosso vivo. La differenziazione si basa sulla fermentazione del lattosio: in presenza di rosso neutro i microrganismi che fermentano il lattosio danno colonie rosse, mentre quelli che non lo fermentano danno colonie incolori (Salmonella e Shigella). Se non si applica il secondo strato, le colonie di Escherichia coli che si sviluppano sulla superficie della piastra sono grandi e rosa, mentre quelle di Enterobacter aerogenes sono pallide con il centro rosa.

Preparazione

Sospendere 42,5 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. EVITARE DI SURRISCALDARE. NON STERILIZZARE IN AUTOCLAVE. Raffreddare a 45-50 °C e distribuire in piastre di Petri. Il surriscaldamento può aumentare il grado di inibizione.

Istruzioni per l'uso

Incubare a 35 ± 2 °C per 18-24 ore.

• Standard Methods for the Examination of Dairy Products. Eleventh Edition APHA Inc. New York 1960.
• Recommended Methods for the Microbiological Examination of Foods APHA Inc. New York 1960.
• American Public Health Association. 1960. Standard methods for the examination of water and wastewater, 11th ed. American Public Health Association, Washington, D.C.