Terreni disidratati
WL Differential Agar
Terreno selettivo usato nel controllo dei processi di fermentazione industriali, in particolare nell'industria della birra.
- Codice
- LC-1026
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
WL Differential Agar è un terreno selettivo per l'isolamento e la conta della flora microbica, usato insieme a WL Nutrient Agar (LC-1086) per il controllo della produzione della birra e di altri processi di fermentazione da lieviti. I due terreni sono molto usati nelle industrie dell'aceto, dei lieviti per panificazione, dell'uva e della vitivinicoltura e dei distillati. Nella produzione di lieviti per le industrie della panificazione e della distillazione, il pH dei terreni è regolato a 6,5.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Conta selettiva e isolamento selettivo dei microrganismi dell'industria della birra.
Settori
Bevande alcoliche.
Preparazione
80 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
Il terreno permette la moltiplicazione selettiva dei lieviti nei liquidi di fermentazione, che contengono una microflora mista di funghi e batteri. Quando il numero di lieviti presenti è relativamente basso, si possono rilevare anche alcuni batteri.
Il triptone fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. Il destrosio è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il fosfato monopotassico è il tampone. I cloruri di potassio, di calcio e ferrico forniscono tutti ioni essenziali per l'equilibrio osmotico. I solfati di magnesio e di manganese sono fonti di cationi bivalenti. Il porpora di bromocresolo è l'indicatore di pH. L'agar batteriologico è l'agente solidificante. L'aggiunta di 0,004 grammi di cicloesimide trasforma la formula di WL Nutrient in un terreno differenziale, che inibisce lo sviluppo di lieviti e muffe e permette una notevole proliferazione dei batteri presenti nei liquidi di fermentazione, con la loro successiva identificazione e conta.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige con sfumatura blu |
| Colore del terreno preparato | Blu |
| pH finale (25 °C) | 5,5 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 80 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Destrosio | 50 |
| Agar batteriologico | 20 |
| Verde di bromocresolo | 0,022 |
| Cloruro di calcio | 0,125 |
| Cicloesimide | 0,004 |
| Cloruro ferrico | 0,0025 |
| Solfato di magnesio | 0,125 |
| Solfato di manganese | 0,0025 |
| Fosfato monopotassico | 0,55 |
| Cloruro di potassio | 0,425 |
| Triptone | 5 |
| Estratto di lievito | 4 |
Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 80 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Istruzioni per l'uso
- Inoculare la sospensione iniziale e/o il campione diluito.
- Distribuire l'inoculo sulla superficie dell'agar con un'ansa sterile.
- Incubare le piastre capovolte alla temperatura di 35 ± 2 °C per 24-48 ore.
Il tempo e la temperatura di incubazione sono fattori importanti secondo il tipo di lievito. In generale sono adatte temperature di 25 °C per i lieviti della birra e di 30 °C per i lieviti da panificazione e degli altri processi di fermentazione alcolica. Il tempo di incubazione va da 2 a 7 giorni e fino a 14 giorni, secondo la flora trovata.
Anche l'atmosfera scelta per incubare la coltura deve essere adatta. I lieviti da panificazione si incubano in aerobiosi, mentre i lieviti della fermentazione alcolica si incubano in anaerobiosi e in presenza di CO₂.
Controllo qualità
Prova microbiologica
Condizioni di incubazione: 30 °C / 24-48 h.
| Microrganismo | Specifica |
|---|---|
| Escherichia coliATCC 25922 | Crescita buona |
| Proteus mirabilisATCC 25933 | Crescita buona |
| Saccharomyces cerevisiaeATCC 9080 | Crescita inibita |
| Lactobacillus fermentumATCC 9338 | Crescita buona |
| Saccharomyces cerevisiaeATCC 9763 | Crescita inibita |
Bibliografia
- Green and Grey. Wallerstein Lab. Comm. 13:357. 1950.
- Green and Grey. Wallerstein Lab. Comm. 14:169, 1951.
- Applicable to bacteriological investigation in brewing. Wallerstein Lab. Comm. 13:357.
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