Terreni disidratati
KAA Confirmatory Agar
Per l'isolamento e la conferma degli enterococchi intestinali negli alimenti secondo Mossel.
- Codice
- LC-1027
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
KAA Confirmatory Agar (Kanamycin, Aesculin, Azide) è un terreno selettivo per l'isolamento e la conferma degli enterococchi intestinali negli alimenti. KAA Confirmatory Agar si usa per confermare le provette positive di KAA Presumptive Broth (LC-1209).
Caratteristiche principali
Applicazioni
Conferma e isolamento selettivo degli enterococchi.
Settori
Alimenti.
Preparazione
48 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
La kanamicina, la sodio azide e il citrato di sodio hanno un forte effetto inibitore sulla flora batterica di accompagnamento: inibiscono la crescita dei batteri Gram-positivi e Gram-negativi, e il terreno è altamente selettivo per gli enterococchi che idrolizzano l'esculina. L'esculina e il citrato ferrico ammonico sono indicatori dell'esculina che rilevano i batteri che idrolizzano l'esculina. Questi batteri idrolizzano l'esculina dando glucosio ed esculetina. Questi microrganismi presentano zone nere intorno alle colonie, per la reazione dell'esculetina formata con gli ioni ferro. Il triptone fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B, essenziali per la crescita batterica. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.
La presenza di enterococchi intestinali è un indicatore di contaminazione fecale, soprattutto quando la contaminazione è avvenuta molto tempo prima e i batteri coliformi, meno resistenti, tra cui Escherichia coli, sono già morti quando si esegue l'analisi.
Gli enterococchi intestinali crescono formando colonie piccole e traslucide circondate da un alone nero. Questo terreno è raccomandato dal CeNAN per l'analisi di alimenti e bevande.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Grigio tornasole |
| pH finale (25 °C) | 7,0 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 48 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Agar batteriologico | 15 |
| Esculina | 1 |
| Citrato ferrico ammonico | 0,5 |
| Kanamicina solfato | 0,02 |
| Sodio azide | 0,15 |
| Cloruro di sodio | 5 |
| Citrato di sodio | 1 |
| Triptone | 20 |
| Estratto di lievito | 5 |
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 48 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 50 °C, mescolare bene e distribuire in piastre.
Istruzioni per l'uso
Seminare per striscio per ottenere colonie isolate e incubare a 35 ± 2 °C per 24-48 ore.
Controllo qualità
Prova microbiologica
Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 24-48 h.
| Microrganismo | Specifica | Reazione caratteristica |
|---|---|---|
| Enterococcus faecalisATCC 11700 | Crescita buona | Colonie verde oliva-nere, idrolisi dell'esculina positiva |
| Escherichia coliATCC 11775 | Inibizione totale | |
| Enterococcus faeciumATCC 19434 | Crescita buona | Colonie verde oliva-nere, idrolisi dell'esculina positiva |
| Staphylococcus aureusATCC 6538 | Crescita moderata |
Bibliografia
- M.R. Pascual Anderson. Técnicas para Examen Microbiológico de Alimentos y Bebidas (Centro Nacional de Alimentación y Nutrición CeNAN) Madrid, 1982.
- Brandl, E. Aspergerger H., Pfleger, F. U-IBEN CH: Zum Vorkomment von D-streptokokken in Käse. 1985.
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