Dichloran Glycerol Agar (DG 18) ISO

Il glicerolo riduce l'attività dell'acqua da 0,999 a 0,95, riducendo così la crescita batterica, ed è anche la fonte di carbonio.

Il cloramfenicolo è un antibiotico che aiuta a isolare i funghi patogeni da materiale molto contaminato, perché inibisce la maggior parte dei batteri contaminanti. È un antibiotico raccomandato per l'uso nei terreni per la sua stabilità al calore e il suo ampio spettro antibatterico. L'inibizione della crescita batterica e la limitazione della diffusione delle muffe a crescita più rapida aiutano l'isolamento dei funghi a crescita lenta, impedendo che siano sopraffatti dalle specie a crescita più rapida. Il dicloran impedisce la rapida diffusione dei funghi mucoracei, migliorando la conta delle colonie.

Il peptone fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. Il destrosio è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia. Il fosfato di potassio agisce da sistema tampone. Il solfato di magnesio fornisce zolfo e altri oligoelementi. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.

Preparazione

Sospendere 31,6 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Aggiungere 175 mL di glicerolo. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 45-50 °C e versare in piastre di Petri.

Istruzioni per l'uso

1. Usare due piastre diverse.
2. Su una piastra di DG 18, trasferire 0,1 mL del campione da analizzare se il campione è liquido, oppure 0,1 mL della sospensione iniziale se il campione non è liquido.
3. Su una seconda piastra di DG 18, trasferire 0,1 mL della prima diluizione decimale (10⁻¹) se il campione è liquido, oppure 0,1 mL della seconda diluizione decimale (10⁻²) se non lo è.
4. Inoculare e incubare a 25 ± 1 °C.
5. Esaminare la crescita dopo 5-7 giorni. Se si sospetta la presenza di Xeromyces bisporus, incubare le piastre per 10 giorni.
6. Selezionare le piastre con < 150 colonie e contarle. Se le muffe a crescita rapida sono un problema, contare le colonie dopo 2 giorni e di nuovo dopo 5-7 giorni di incubazione.
7. Questo numero si può riportare come numero di colonie xerofile per grammo di alimento.

• ISO 21527-2: Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the enumeration of yeasts and moulds - Part 2: Colony count technique in products with water activity less than or equal to 0.95.
• Hocking, A.D. and Pitt, J.I. (1980) Dichloran-glycerol medium for enumeration of xerophilic fungi from low moisture foods. Appl. Environm. Microbiol. 39, 488-492.