Rose Bengal Agar + Chloramphenicol + Dichloran (DRBC Agar) ISO

Il peptone è la fonte di azoto, vitamine, minerali e aminoacidi. Il destrosio è il carboidrato fermentabile, fonte di carbonio e di energia. Il fosfato di potassio è il tampone. Il solfato di magnesio fornisce zolfo e altri oligoelementi. Il rosa bengala è un agente selettivo che inibisce la crescita dei batteri e limita la dimensione e l'altezza delle muffe a crescita più rapida, permettendo lo sviluppo e la rilevazione di altri lieviti a crescita più lenta. Le muffe appaiono di colore rosa. Il cloramfenicolo agisce da agente selettivo, inibendo la crescita batterica. È un antibiotico raccomandato per i terreni neutri per la sua stabilità al calore e il suo ampio spettro antibatterico. L'aggiunta di dicloran impedisce la rapida diffusione dei funghi mucoracei e limita anche la dimensione delle colonie degli altri generi, migliorando la conta delle colonie. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.

Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.

Preparazione

Sospendere 31,6 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 44-47 °C, mescolare bene e distribuire in piastre.

Secondo ISO 21527

Per la conta di lieviti e muffe secondo ISO 21527:

1. Preparare la porzione da analizzare, la sospensione iniziale (diluizione primaria) e le diluizioni successive.
2. Trasferire 0,1 mL del campione da analizzare su una piastra di DRBC agar.
3. Su una seconda piastra di DRBC agar, trasferire 0,1 mL della prima diluizione decimale (10⁻¹) oppure 0,1 mL della diluizione 10⁻².
4. Distribuire il liquido sulla superficie della piastra di agar fino al completo assorbimento del liquido nel terreno.
5. Incubare le piastre preparate in aerobiosi, con il coperchio in alto, a 25 ± 1 °C per 5 giorni.
6. Contare e selezionare le colonie per la conferma.

• King, D.A. and Pitt, J.I. (1979) Dichloran-rose Bengal medium for enumeration and isolation of moulds from foods. Appl. Environm. Microbiol. 37, 959-964.
• ISO 21527 - Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the enumeration of yeasts and moulds - Part 1: Colony count technique in products with water activity greater than 0.95.