Sodium Chloride Buffered Peptone Solution EP

Questa soluzione è un terreno non inibente, che permette quindi un facile recupero dei microrganismi stressati. È ricca di nutrienti, dà un alto recupero delle cellule danneggiate e intensifica la crescita dei microrganismi. Una caratteristica comune a tutti i terreni selettivi è che i microrganismi con lesioni subletali in genere non vengono rilevati; per questo nelle procedure di esame si deve includere una fase di recupero.

Le variazioni di pH possono danneggiare la crescita batterica. Sodium Chloride Buffered Peptone Solution mantiene un pH alto grazie al sistema tampone dei fosfati e permette la riparazione delle cellule lesionate sensibili al pH basso. Il peptone di carne fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico.

Preparazione

Sospendere 16,10 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in contenitori adatti e sterilizzare a 121 °C per 15 minuti.

Secondo la Farmacopea Europea

Secondo la Farmacopea Europea, per l'esame di TAMC e TYMC nei prodotti:

Filtrazione su membrana:

1. Preparare il campione del prodotto sospendendo, sciogliendo o diluendo il prodotto da esaminare in Sodium Chloride Buffered Peptone Solution.
2. Trasferire la quantità adatta di campione su una membrana filtrante.
3. Porre la membrana sulla superficie di Trypticasein Soy Agar (LC-1068) nel caso di TAMC o di Sabouraud Dextrose Agar (LC-1024) nel caso di TYMC.
4. Incubare la piastra di Trypticasein Soy Agar (LC-1068) a 30-35 °C per 3-5 giorni e la piastra di Sabouraud Dextrose Agar (LC-1024) a 20-25 °C per 5-7 giorni.

Metodi di conta su piastra:

1. Preparare il campione del prodotto sospendendo, sciogliendo o diluendo il prodotto da esaminare in Sodium Chloride Buffered Peptone Solution.
2. Inoculare le piastre di Trypticasein Soy Agar (LC-1068) nel caso di TAMC o di Sabouraud Dextrose Agar (LC-1024) nel caso di TYMC, secondo il metodo per inclusione o il metodo per spatolamento in superficie.
3. Incubare le piastre di Trypticasein Soy Agar (LC-1068) a 30-35 °C per 3-5 giorni e le piastre di Sabouraud Dextrose Agar (LC-1024) a 20-25 °C per 5-7 giorni.
4. Selezionare le piastre corrispondenti a una data diluizione che mostrano il numero più alto di colonie inferiore a 250 (TAMC) o a 50 (TYMC).

Metodo del numero più probabile (solo per TAMC):

1. Preparare e diluire il campione del prodotto da esaminare in Sodium Chloride Buffered Peptone Solution e inoculare in provette di Trypticasein Soy Broth (LC-1224).
2. Incubare tutte le provette a 30-35 °C per 3-5 giorni.
3. Registrare per ogni livello di diluizione il numero di provette che mostrano crescita e determinare il numero più probabile di microrganismi.

• European Pharmacopoeia 9.0