Terreni disidratati
Enterococcus Confirmatory Agar
Per la conferma della presenza di enterococchi nelle acque e in altre fonti di interesse sanitario.
- Codice
- LC-1018
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
Enterococcus Confirmatory Agar si usa per confermare la presenza di enterococchi nelle acque e in altre fonti di interesse sanitario.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Isolamento selettivo degli enterococchi.
Settori
Acque.
Preparazione
30,4 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
La presenza di enterococchi intestinali, detti anche streptococchi fecali, è un indicatore di contaminazione fecale, soprattutto quando la contaminazione è avvenuta molto tempo prima e i batteri coliformi meno resistenti, compreso Escherichia coli, possono essere già morti al momento dell'analisi.
Il peptone di caseina fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B, essenziali per la crescita batterica. Il destrosio è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia. La sodio azide inibisce i batteri Gram-negativi e il blu di metilene è un inibitore di alcuni batteri Gram-positivi. Il blu di metilene è anche l'indicatore di pH. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.
Alle provette preparate aggiungere in asepsi, fino a coprire metà della superficie inclinata, un volume di Enterococcus Selective Broth (LC-1204) oppure di Enterococcus Confirmatory Broth (stessa formulazione di questo terreno, ma senza agar). Con la crescita ottenuta in KAA Presumptive Broth (LC-1209), inoculare sia la superficie sia il brodo nella provetta con la miscela Confirmatory Agar/Broth.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige-blu |
| Colore del terreno preparato | Blu verdastro |
| pH finale (25 °C) | 8,0 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 30,4 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Destrosio | 5 |
| Agar batteriologico | 15 |
| Peptone di caseina | 5 |
| Blu di metilene | 0,01 |
| Sodio azide | 0,4 |
| Estratto di lievito | 5 |
Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 30,4 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in provette e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Lasciar raffreddare in posizione inclinata, in modo da ottenere un fondo profondo 1,5-2,0 cm.
Istruzioni per l'uso
Incubare a 35 ± 2 °C per 18 ore ed esaminare per rilevare la presenza di piccole colonie puntiformi. Eseguire una colorazione di Gram e osservare al microscopio, cercando lunghe catene di cellule ovoidi. Eseguire subito una prova della catalasi aggiungendo 5 mL di H₂O₂ alla provetta in esame. Se non si formano gas (prova negativa), questo costituisce la conferma degli enterococchi nel campione.
Controllo qualità
Prova microbiologica
Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 18 h.
| Microrganismo | Specifica |
|---|---|
| Enterococcus faecalisATCC 19433 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 25922 | Inibizione totale |
| Enterococcus faeciumATCC 6057 | Crescita buona |
Bibliografia
- Winter and Sandholzer U.S. Dept. Interior Fishery, Leaflet 201 Part II, Nov. 1946.
- Ewing W.H. 1986. Edwards and Ewing's identification of Enterobacteriaceae 4th Edition.
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