Terreni per biologia molecolare
Induction Base Medium
Terreno per il mantenimento e la propagazione del promotore PL nei ceppi di E. coli GI724, GI826 e GI698.
- Codice
- LC-1540
- Categoria
- Terreni per biologia molecolare
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
Induction Base Medium si usa per il mantenimento e la propagazione del promotore PL nei ceppi di E. coli GI724, GI826 e GI698 e per aumentare la resa di plasmide durante il sequenziamento dei cloni positivi. Questi ceppi contengono il gene del repressore cI di lambda sotto il controllo del promotore trp inducibile dal triptofano. Questo terreno ha bassi livelli di triptofano.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Preparazione e recupero di cellule competenti di Escherichia coli.
Settori
Terreni di coltura per biologia molecolare.
Preparazione
12,6 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti, aggiungere glucosio e ampicillina.
Principio e uso
I casaminoacidi forniscono i nutrienti e i cofattori necessari per una buona crescita dei ceppi ricombinanti di E. coli. Grazie al loro maggiore grado di digestione, i casaminoacidi sono un'eccellente fonte di aminoacidi liberi. I fosfati agiscono da sistema tampone. Il cloruro di ammonio e il solfato di magnesio forniscono ioni essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Ambra |
| pH finale (25 °C) | 7,0 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 12,6 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Cloruro di ammonio | 1 |
| Casaminoacidi | 2 |
| Fosfato disodico | 6 |
| Fosfato monopotassico | 3 |
| Cloruro di sodio | 0,5 |
| Cloruro di magnesio | 0,095 |
Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 12,6 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a temperatura ambiente, aggiungere in condizioni sterili 25 mL di una soluzione di glucosio al 20 % e 1 mL di ampicillina (100 g/mL). Mescolare bene.
Istruzioni per l'uso
Consultare un riferimento appropriato per le procedure di prova raccomandate.
Controllo qualità
Prova microbiologica
Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 18-24 h.
| Microrganismo | Specifica |
|---|---|
| Escherichia coliATCC 23724 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 33694 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 33849 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 39403 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 47014 | Crescita buona |
Bibliografia
- La Vallie, E, R. et al. (1992) Bio/Technology 11: 187-193.
- Mieschendahl, M. et al. (1996) Bio/Technology 4: 802-808.
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